第一篇：分析方法驗證或確認(rèn)內(nèi)容

分析方法驗證內(nèi)容確定

（1）化學(xué)（儀器）分析方法驗證內(nèi)容可按下表確定

（2）化學(xué)（儀器）分析方法確認(rèn)內(nèi)容可由兩名檢驗人員分別對同一批產(chǎn)品進(jìn)

行檢驗（如可能，使用不同的儀器），比較兩人的檢測結(jié)果來證明方法在本實驗室（人員、分析儀器、試劑等）的適用性，也可根據(jù)確認(rèn)目的和評估結(jié)果選擇相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行確認(rèn)。

（1）生物分析方法驗證內(nèi)容可按下表確定

注：“是”代表該項內(nèi)容需要驗證，“否”代表該項內(nèi)容不需要驗證。（2）生物分析方法如需確認(rèn)，則根據(jù)確認(rèn)目的和評估結(jié)果選擇相關(guān)Ⅱ內(nèi)容進(jìn)

行確認(rèn)。

微生物分析方法驗證內(nèi)容確定

（1）若為藥典或其他法規(guī)的方法，驗證時按藥典的規(guī)定進(jìn)行驗證（2）若為藥典或其他法規(guī)的替代方法，則需按下表進(jìn)行驗證

注：“是”代表該項內(nèi)容需要驗證，“否”代表該項內(nèi)容不需要驗證。

第二篇：確認(rèn)和驗證(征求意見稿)

確認(rèn)與驗證

（征求意見稿）

第一章 范圍

第一條 本附錄適用于《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》中涉及的所有確認(rèn)與驗證活動。

第二章 原則

第二條 為證明對具體操作關(guān)鍵方面的有效控制，應(yīng)該進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)或驗證工作。確認(rèn)或驗證的范圍和程度應(yīng)當(dāng)進(jìn)行風(fēng)險評估來確定。應(yīng)持續(xù)評估確認(rèn)和驗證的狀態(tài)。

第三章 驗證計劃

第三條 所有的確認(rèn)與驗證活動都應(yīng)事先計劃。確認(rèn)與驗證的關(guān)鍵要素都應(yīng)在驗證總計劃或同類文件中詳細(xì)說明。

第四條 驗證總計劃應(yīng)包含以下信息：

1.確認(rèn)與驗證的管理要求；

2.確認(rèn)與驗證活動的組織機(jī)構(gòu)；

3.待確認(rèn)或驗證項目的概述；

4.文件格式，包括確認(rèn)或驗證方案和報告的格式；

5.計劃和日程安排；

6.變更控制；

7.所引用的文件、文獻(xiàn)。

第五條 對于較大項目，可單獨制訂驗證計劃。

第四章 文件

第六條 確認(rèn)與驗證方案應(yīng)當(dāng)經(jīng)過審核和批準(zhǔn)。確認(rèn)與驗證方案應(yīng)詳述關(guān)鍵步驟和可接受標(biāo)準(zhǔn)。

第七條 確認(rèn)與驗證活動結(jié)束后，應(yīng)及時撰寫驗證報告，匯總獲得的數(shù)據(jù)和結(jié)果，對觀察到的偏差進(jìn)行評估，得出必要的結(jié)論，提出必要的糾正和預(yù)防措施。確認(rèn)與驗證方案中的變更，應(yīng)有相應(yīng)記錄并有適當(dāng)?shù)慕忉?，驗證報告應(yīng)通過書面批準(zhǔn)。

第八條 當(dāng)驗證和確認(rèn)分階段進(jìn)行時，只有當(dāng)上一階段的驗證與確認(rèn)活動符合預(yù)定目標(biāo)且經(jīng)書面批準(zhǔn)后，方可進(jìn)入下一階段確認(rèn)和驗證活動。1

第五章 確認(rèn)

第一節(jié) 設(shè)計確認(rèn)

第九條 新設(shè)施、系統(tǒng)或設(shè)備驗證的第一個步驟為設(shè)計確認(rèn)。

第十條 企業(yè)應(yīng)按照預(yù)定用途和本規(guī)范要求制定用戶需求。設(shè)計確認(rèn)應(yīng)證明設(shè)計符合用戶需求，并有相應(yīng)記錄。

第二節(jié) 安裝確認(rèn)

第十一條 新的設(shè)施或改建的設(shè)施、系統(tǒng)或設(shè)備需安裝確認(rèn)。

第十二條 安裝確認(rèn)應(yīng)包括但不限于以下方面：

1.企業(yè)應(yīng)根據(jù)設(shè)計確認(rèn)中提出的技術(shù)要求對設(shè)施、系統(tǒng)或設(shè)備進(jìn)行驗收并記錄；

2.根據(jù)最新的工程圖紙和技術(shù)規(guī)格/標(biāo)準(zhǔn)說明書，檢查設(shè)備、管道、公用設(shè)施和儀器的安裝是否符合要求；

3.收集及整理（歸檔）由供應(yīng)商提供的操作指南、維護(hù)保養(yǎng)手冊；

4.相應(yīng)的儀器儀表應(yīng)進(jìn)行必要的校準(zhǔn)。

第三節(jié) 運行確認(rèn)

第十三條 安裝確認(rèn)完成并符合要求后，應(yīng)進(jìn)行運行確認(rèn)。

第十四條 運行確認(rèn)應(yīng)包括但不限于以下方面：

1.根據(jù)生產(chǎn)工藝、系統(tǒng)和設(shè)備的預(yù)定用途制定運行測試項目。

2.試驗/測試應(yīng)在一種或一組運行條件之下進(jìn)行，包括設(shè)備運行的上下限，必要時采用“最差條件”進(jìn)行確認(rèn)。

3.必要的校準(zhǔn)、操作、清潔和預(yù)防性維護(hù)保養(yǎng)程序的建立、對操作人員培訓(xùn)等內(nèi)容。

第四節(jié) 性能確認(rèn)

第十五條 性能確認(rèn)應(yīng)包括但不限于以下方面：

1.根據(jù)對生產(chǎn)工藝、系統(tǒng)和設(shè)備的相關(guān)知識制定性能確認(rèn)方案，使用正常生產(chǎn)的物料、適當(dāng)?shù)奶娲坊蛘吣M產(chǎn)品來進(jìn)行試驗/測試；

2.應(yīng)在一種或幾種條件之下進(jìn)行試驗/測試，試驗/測試的操作條件可包括設(shè)定的運行參數(shù)的上下限。

第十六條 有些情況下，可將性能確認(rèn)與運行確認(rèn)結(jié)合進(jìn)行。

第五章 工藝驗證

第一節(jié) 通則

第十七條 工藝驗證包括新工藝的首次驗證、影響產(chǎn)品質(zhì)量的重大變更后的驗證和再驗證。

第十八條 工藝驗證的方法一般應(yīng)采用前驗證。在極個別情況下，如無法進(jìn)行前驗證時，才可采用同步驗證。

第十九條 已運行了一段時間的工藝應(yīng)進(jìn)行評估，必要時需進(jìn)行再驗證。第二十條 擬使用的設(shè)施、系統(tǒng)和設(shè)備應(yīng)經(jīng)過確認(rèn)并符合要求后方可投入使用，分析方法也應(yīng)經(jīng)過驗證。參與確認(rèn)或驗證的人員應(yīng)經(jīng)過適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn)。

第二節(jié) 前驗證

第二十一條 前驗證應(yīng)包括但不限于以下方面：

1.工藝的簡短描述；

2.應(yīng)驗證的關(guān)鍵工藝步驟的概述；

3.所要使用的設(shè)備、設(shè)施清單（包括稱量、監(jiān)控和記錄設(shè)備）以及它們的校準(zhǔn)狀態(tài)；

4.成品放行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；

5.相應(yīng)的檢驗方法清單；

6.中間控制參數(shù)及可接受標(biāo)準(zhǔn)；

7.擬進(jìn)行的額外試驗和可接受標(biāo)準(zhǔn)，以及分析方法驗證；

8.取樣方法及計劃；

9.記錄和評估結(jié)果的方法（包括偏差處理）；

10.職能部門和職責(zé)；

11.建議的時間進(jìn)度表。

第二十二條 工藝驗證的批次數(shù)應(yīng)足夠多并進(jìn)行多方面考察，并有足夠的數(shù)據(jù)進(jìn)行評估。通常連續(xù)三批運行均在預(yù)定的參數(shù)范圍內(nèi)，可認(rèn)為符合要求。第二十三條 工藝驗證的批量應(yīng)與常規(guī)生產(chǎn)的批量相同。

第三節(jié) 同步驗證

第二十四條 在極個別情況下，允許在驗證未完成前開始常規(guī)生產(chǎn)。第二十五條 對進(jìn)行同步驗證的決定必須證明其合理性、并記錄且經(jīng)過質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人員的批準(zhǔn)。

第二十六條 同步驗證的文件要求與前驗證文件相同。

第四節(jié) 回顧性驗證

第二十七條 回顧性驗證屬于再驗證的一種方式，僅適用于良好確立的穩(wěn)定工藝，當(dāng)近期內(nèi)產(chǎn)品的成分、操作規(guī)程或設(shè)備已有變更時，則不得采用回顧性前驗證的方式。

第二十八條 此類的工藝驗證應(yīng)基于歷史數(shù)據(jù)。驗證的步驟包括：制定具體的驗證方案、對數(shù)據(jù)資料回顧審核并出具報告，得出結(jié)論并提出建議。第二十九條 回顧性前驗證的原始數(shù)據(jù)可包括批生產(chǎn)記錄、批包裝記錄、工藝控制圖、維修日志、人員變更記錄、工藝能力分析，成品數(shù)據(jù)（包括趨勢圖和穩(wěn)定性測試結(jié)果）等。

第三十條 所選擇進(jìn)行回顧性驗證批次，應(yīng)能代表回顧階段中生產(chǎn)的所有批次，包括沒有達(dá)到規(guī)定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的批次。此外，應(yīng)有足夠數(shù)量的批次，以證明所采用工藝的一致性。必要時，可對留樣進(jìn)行額外的檢驗，以獲得一定數(shù)量或類型的數(shù)據(jù)，用于工藝的回顧性驗證。

第三十一條 回顧性驗證通常需10~30個連續(xù)批次，以評估所采用工藝的一致性，但如有適當(dāng)理由，回顧的批次數(shù)可減少?；仡櫺则炞C方案中應(yīng)對理由予以書面說明。

第六章 清潔驗證

第三十二條 為確認(rèn)清潔操作規(guī)程的有效性，應(yīng)進(jìn)行清潔驗證。應(yīng)根據(jù)所涉及的物料，合理地確定產(chǎn)品殘留、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。

第三十三條 應(yīng)使用經(jīng)驗證的、檢出靈敏度高的檢驗方法來檢測殘留或污染物。每種分析方法或儀器的檢測靈敏度應(yīng)足以檢測出設(shè)定合格限度水平的殘留或污染物。

第三十四條 通常只有接觸產(chǎn)品設(shè)備表面的清潔規(guī)程需要驗證。某些場合下，還應(yīng)考慮不直接接觸產(chǎn)品的部分。應(yīng)驗證并確定設(shè)備使用后至清潔前的間隔時間，以及設(shè)備清潔后的保存時限。

第三十五條 對于相似的產(chǎn)品和相似工藝采用同一清潔操作規(guī)程的，可選擇具有代表性的產(chǎn)品和工藝進(jìn)行清潔驗證?？刹捎谩白畈顥l件”的方法進(jìn)行單獨的驗證試驗，在驗證中應(yīng)考慮關(guān)鍵因素。

第三十六條 清潔驗證通常應(yīng)進(jìn)行至少連續(xù)3批試驗，并符合可接受標(biāo)準(zhǔn)。第三十七條 如果實際產(chǎn)品是有毒物質(zhì)或有害物質(zhì)，在清潔驗證中，可以例外地采用物化特性相似的無毒無害物質(zhì)來模擬。

第七章 再驗證

第三十八條 對設(shè)施、系統(tǒng)、設(shè)備和工藝，包括清潔應(yīng)進(jìn)行定期評估，以確認(rèn)它們處在經(jīng)驗證的受控狀態(tài)。

第三十九條 當(dāng)驗證狀態(tài)未發(fā)生重大變化，可采用對設(shè)施、系統(tǒng)、設(shè)備和工藝等的回顧審核，來滿足再驗證的要求。關(guān)鍵的生產(chǎn)工藝和操作規(guī)程應(yīng)當(dāng)定

期進(jìn)行再驗證，確保其能夠達(dá)到預(yù)期效果。

第九章 術(shù)語

1.設(shè)計確認(rèn)

為確認(rèn)設(shè)施、系統(tǒng)和設(shè)備的設(shè)計方案符合期望目標(biāo)所作的各種查證及文件記錄。

2.安裝確認(rèn)

為確認(rèn)安裝或改造后的設(shè)施、系統(tǒng)和設(shè)備符合已批準(zhǔn)的設(shè)計及制造商建議所作的各種查證及文件記錄。

3.運行確認(rèn)

為確認(rèn)已安裝或改造后的設(shè)施、系統(tǒng)和設(shè)備能在預(yù)期的范圍內(nèi)正常運行而作的試車、查證及文件記錄。

4.性能確認(rèn)

為確認(rèn)已安裝連接的設(shè)施、系統(tǒng)和設(shè)備能夠根據(jù)批準(zhǔn)的生產(chǎn)方法和產(chǎn)品的技術(shù)要求有效穩(wěn)定（重現(xiàn)性好）運行所作的試車、查證及文件記錄。

5.工藝驗證

為證明工藝在設(shè)定參數(shù)范圍內(nèi)能有效穩(wěn)定地運行并生產(chǎn)出符合預(yù)定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量特性藥品的驗證活動。

6.前驗證

在供市場銷售用藥品常規(guī)生產(chǎn)前所進(jìn)行的驗證。

7.同步驗證

與正常生產(chǎn)同步進(jìn)行且所得產(chǎn)品意在投放市場的驗證活動。

8.回顧性驗證

根據(jù)產(chǎn)品批的生產(chǎn)、檢驗和控制的積累數(shù)據(jù)資料，對一個已投放市場的產(chǎn)品工藝所作的驗證。

9.清潔驗證

有文件和記錄證明所批準(zhǔn)的清潔規(guī)程肯定能使設(shè)備符合藥品生產(chǎn)要求的試驗及相關(guān)活動。

10.再驗證

為確保按變更控制規(guī)程所作的工藝/設(shè)備的變更，對工藝特性和產(chǎn)品質(zhì)量無不良影響而進(jìn)行的重復(fù)性驗證。

11.模擬產(chǎn)品

與被驗證產(chǎn)品物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)十分相似的產(chǎn)品。在很多情況下，安慰劑產(chǎn)品的批可滿足理化特征的要求。

12.最差條件

在SOP范圍內(nèi)，由工藝參數(shù)的上、下限和相關(guān)因素組成的一個或一系列條件。與理想條件相比時，最差條件使產(chǎn)品或者生產(chǎn)工藝失敗的幾率為最大，這樣的條件不一定導(dǎo)致產(chǎn)品或生產(chǎn)工藝的失敗。

第三篇：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證

一、目的：證明所采用的分析方法適合于相應(yīng)的檢測要求。

二、用途

（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草時，分析方法需經(jīng)驗證。

（二）藥物生產(chǎn)方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂時，分析方法需經(jīng)驗證。

三、需驗證的分析項目

1.鑒別試驗；

2.雜質(zhì)定量或限度檢查；

3.原料或制劑中有效成分含量測定；

4.制劑中其它成分（降解產(chǎn)物、防腐劑等）的測定；

5.溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測試方法

四、驗證內(nèi)容

準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性

（一）線性（Linearity）

在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。

?方法：應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法進(jìn)行測定（n≥5）。以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。

?數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖

UV法：吸光度A一般在0.2～0.8，濃度點n＝5。用濃度c對A作線性回歸處理，得一直線方程，r應(yīng)達(dá)到0.9999(n＝5)，方程的截距應(yīng)近于零。

HPLC法: 用精制品配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度點n應(yīng)為5～7，用濃度c對峰高h(yuǎn)或被測物的響應(yīng)值(峰面積A)之比進(jìn)行回歸處理，建立回歸方程，r應(yīng)大于0.999，截距應(yīng)趨于零。

（二）準(zhǔn)確度（accuracy）

準(zhǔn)確度是指用該方法測定的結(jié)果與真實值接近的程度，用百分回收率表示。

測定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗法”和“加樣回收試驗法”?；厥赵囼灒嚎瞻?已知量的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M

回收率R?測定平均值?空白?100% 加入量

加樣回收試驗 ： 已準(zhǔn)確測定藥物含量P的真實樣品+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為MR?M?P?100% A

數(shù)據(jù)要求：可向制劑中加入已知量的被測物對照品進(jìn)行測定規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備高、中、低三個不同濃度樣品各測三次。

（三）精密度（precision）

精密度是指在規(guī)定條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差（d）、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)表示。

相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），也稱變異系數(shù)（CV）

RSD?S?100%S?2??x??i

n?

11.重復(fù)性(repeatability):

在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當(dāng)作100%，至少測6次進(jìn)行評價。

2.中間精密度同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度。

3.重現(xiàn)性(reproducibility)不同實驗室，不同分析人員測定結(jié)果的精密度。

數(shù)據(jù)要求：需報告RD，RSD和可信限。

（四）檢測限（LOD）

檢測限系指試樣在確定的實驗條件下，被測物能被檢測出的最低濃度或含量。是限度檢驗效能指標(biāo)，無需定量測定，只要指出高于或低于該規(guī)定濃度即可。

1．非儀器分析目視法

用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。

2．信噪比法

用于能顯示基線噪音的分析方法（儀器分析方法），是把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1時的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。

（1）空白值＝0時；①測定背景10次以上，求出標(biāo)準(zhǔn)差S空。②將S空乘以三倍；③在工作曲線上求出3 S空相對應(yīng)的濃度X；即為方法的檢出值；

（2）空白值不等于0；①測定背景10次以上，求出標(biāo)準(zhǔn)差S空；②在工作曲線上求出3 S空 相對應(yīng)的濃度X； ③ 將求得的對應(yīng)濃度值加上空白值即得該方法的檢出限。

（五）定量限（LOQ）

指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度要求。

常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為10∶1時相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進(jìn)行確定，也可按1984年國際純粹和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(IVPAC)規(guī)定：用儀器所測空白背景響應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)差（SD）的10倍為估計值，再經(jīng)試驗確定方法的實際測定下限。

儀器分析：通過測定一組空的樣品的背景信號后計算標(biāo)準(zhǔn)差S。以1OS來估算定量限度。（以定量限度制備的樣品來驗證）

非儀器分析：通過分析己知被測物濃度的樣品并確定一個樣品中被測物可被準(zhǔn)確和精密測定出的最低濃度（量）。

（六）耐用性

指測定條件稍有變動時，結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗提供依據(jù)。是衡量在正常情況下實驗結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。

分析方法重現(xiàn)性的測定是通過在不同的實驗室內(nèi)不同的實驗者對同一樣品的分別測試而獲得的。（獲得的這種再與正常檢定下的精密度進(jìn)行比較，從而確定該法的耐用性）

（七）專屬性

（八）范圍

?典型的變動因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)、時間等。

?液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號的同類色譜柱，柱溫，流速等。

?氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體、柱溫，進(jìn)樣口和檢測器溫度等。

經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否通過設(shè)計的系統(tǒng)適用性試驗，以確保方法有效。

含量測定需進(jìn)行的方法學(xué)驗證項目：準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、線性、范圍、耐用性

五、各種含量測定方法對效能指標(biāo)的要求

1.容量分析法：用原料藥精制品(含量>99.5％)或?qū)φ掌房疾旆椒ǖ木芏?，相對?biāo)準(zhǔn)差一般應(yīng)不大于0.2％；進(jìn)行回收率試驗?；厥章室话阍?9.7～100.3％之間。

2.UV法：用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)行測定，其RSD一般不大于應(yīng)在98％～102％之間。

3.HPLC法：要求

第四篇：分析方法的驗證(精)

分析方法的驗證

分析方法的驗證，就是對藥品分析實驗所采用的分析方法是否完全達(dá)到了預(yù)期目的，或證明由分析方法誤差而導(dǎo)致試驗結(jié)果判斷錯誤的概率是否在允許范圍之內(nèi)，而進(jìn)行的科學(xué)證明。

分析方法的驗證以驗證參數(shù)表示。在制定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時，可通過這些參數(shù)證明所建立的分析方法是否適當(dāng)。本文所述分析方法驗證是指下述情況：藥局方新收載品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立；藥局方已收載品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂；根據(jù)藥局方的通則建立替代方法。

定量限界是指樣品中所含的被測物質(zhì)可被進(jìn)行定量的最小量或最低濃度。定量限界所述樣品測定值的精度，以相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，一般為10%。2.5.2 評價方法：通常定量限界可以通過空白樣品或被測物定量限界附近的樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差以及定量限界附近的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率算出。例如，根據(jù)定量限界附近的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率以及空白樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差，由下式求出定量限界。

DL=10σ/slope

DL：定量限界

σ：空白樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差

slope：定量限界附近標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

應(yīng)用色譜法時，測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差可以用信噪比代替。分析方法的定量限界應(yīng)比質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定值要小。2.6 線性關(guān)系

2.6.1 定義：線性關(guān)系是指分析方法能夠得到與被測物質(zhì)的量或濃度具有直線關(guān)系的測定值的能力，必要時，被測物質(zhì)的量或濃度的測定值也可以是從數(shù)學(xué)公式中得到的變換值。

2.6.2 評價方法：準(zhǔn)備一系列不同濃度(量)的被測樣品，按照分析方法的操作步驟進(jìn)行測定，用測定值得到的回歸方程及相關(guān)系數(shù)對線性關(guān)系進(jìn)行評價。必要時，將測定值由回歸方程算出的殘差對被測物質(zhì)的量(濃度)作圖，不應(yīng)具有某種特定的趨勢。通常，采用5個不同量(濃度)的樣品作線性關(guān)系的研究。2.7 范圍(Range)

2.7.1 定義：分析方法驗證中所述范圍是指具有一定精度和準(zhǔn)確度的被測物質(zhì)上限及下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。對于上述具有線性關(guān)系的分析方法則指：具有一定精度和準(zhǔn)確度，并且使線性關(guān)系成立的被測物質(zhì)上下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。

2.7.2 評價方法：分析方法驗證的范圍一般為標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定值的±20%左右，對范圍的上下限值及范圍中央值附近的樣品進(jìn)行精度、真度及線性的研究討論。

驗證參數(shù)

類型Ⅰ

類型Ⅱ

類型Ⅲ

定量試驗 限度試驗 準(zhǔn)確度+ 精密度 并行精度+ 室內(nèi)再現(xiàn)精度-* 室間再現(xiàn)精度+* 專屬性 + + + + 檢出限界定量限界-直線性+ 范圍

+

+

注：-：一般不需要；+：需要；*：視情況而定。室內(nèi)或室間再現(xiàn)精度選擇其一進(jìn)行評價，日本藥局方通常選擇后者進(jìn)行評價。

類型Ⅰ需做鑒別試驗，即對藥品中的主要成分及其特征進(jìn)行鑒別。類型Ⅱ需做檢查試驗，即對藥品中的雜質(zhì)或不純物的量進(jìn)行測定。類型Ⅲ需做含量測定和溶出度試驗，即對藥品中的成分進(jìn)行測定(成分包括穩(wěn)定劑、添加劑等)和藥品有效性試驗。分析方法驗證用語

4.1 適應(yīng)性/牢固性(Robustness)指故意將分析條件在小范圍內(nèi)變化時，測定值不受影響的能力。例如，反應(yīng)的pH值、溫度、室間及試藥的量等分析條件在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)改變時，對測定值的穩(wěn)定性進(jìn)行研究討論。測定值對于分析條件不穩(wěn)定時，應(yīng)對方法加以改進(jìn)。適應(yīng)性的研究結(jié)果在分析方法中以表示分析條件的有效數(shù)字或注意事項的形式得以體現(xiàn)。

4.2 實驗室 指試驗進(jìn)行的場所、設(shè)施。分析方法驗證中所述改變實驗室是指試驗者、裝置以及試藥的批號等試驗條件發(fā)生變化。

4.3 試驗法 指藥局方中的試驗方法，例如鑒別試驗、檢查試驗等。試驗方法應(yīng)包括樣品的制備、規(guī)定值、分析方法等。

4.4 生產(chǎn)者危險率 指合格的制品由于試驗原因而錯判為不合格制品的發(fā)生概率。一般以α表示，也叫第一過失率，也就是在限度試驗中所說的假陽性率。4.5 消費者危險率 指不合格的制品由于試驗原因而錯判為合格制品的發(fā)生概率。一般以β表示，也叫第二過失率，也就是在限度試驗中所說的假陰性率。4.6 測定次數(shù) 指分析方法操作程序中規(guī)定的次數(shù)，為了提高分析方法的精度，有些試驗明確規(guī)定試驗次數(shù)在2次以上，分析方法驗證是對包括分析方法所規(guī)定的測定次數(shù)在內(nèi)的分析方法的評價。它與為了提高分析方法的精度進(jìn)行重復(fù)分析時的重復(fù)次數(shù)不同。

4.7 測定值 一次分析所得到的一個數(shù)值。

第五篇：JP13分析方法的驗證

JP13分析方法的驗證

JP13分析方法的驗證

分析方法的驗證，就是對藥品分析實驗所采用的分析方法是否完全達(dá)到了預(yù)期目的，或證明由分析方法誤差而導(dǎo)致試驗結(jié)果判斷錯誤的概率是否在允許范圍之內(nèi)，而進(jìn)行的科學(xué)證明。

分析方法的驗證以驗證參數(shù)表示。在制定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時，可通過這些參數(shù)證明所建立的分析方法是否適當(dāng)。本文所述分析方法驗證是指下述情況：藥局方新收載品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立；藥局方已收載品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂；根據(jù)藥局方的通則建立替代方法。

1、日本藥局方收載分析方法所需資料

1.1 概要 對分析方法作簡要說明，包括所采用分析方法的必要性，特點與優(yōu)點及有關(guān)驗證的要點。如系分析方法的修訂，則需闡明新方法與原方法的區(qū)別以及新方法的優(yōu)勢。

1.2 分析方法 本項記載的有關(guān)分析方法的內(nèi)容要足以能對分析方法進(jìn)行評價，并且必要時可用復(fù)核試驗進(jìn)行評價。分析方法主要記載內(nèi)容包括：分析的步驟、標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的制備方法、試劑與試藥的調(diào)配、注意事項、分析系統(tǒng)是否正常運轉(zhuǎn)的檢驗證明方法(例如高效液相色譜法中的分離效率的研究)、分析結(jié)果的計算公式、測定次數(shù)等。并且，如果使用了藥局方以外的裝置，還需詳述有關(guān)內(nèi)容；如果使用了新的標(biāo)準(zhǔn)品，則必須提供其物理、化學(xué)及生物學(xué)特征數(shù)據(jù)，并提供其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 有關(guān)分析方法驗證的資料 本項應(yīng)包括求導(dǎo)各驗證參數(shù)的試驗設(shè)計、試驗數(shù)據(jù)、計算結(jié)果及檢定結(jié)果等。

2、驗證參數(shù)(validationcharacterisitics)

分析方法適當(dāng)與否可通過驗證參數(shù)進(jìn)行評價，下面列舉了最典型的分析方法驗證參數(shù)的定義及其評價方法。

驗證參數(shù)的有關(guān)術(shù)語及定義因分析方法的應(yīng)用領(lǐng)域不同而不同，本文所使用的術(shù)語及定義僅限于日本藥局方。評價方法項下所述內(nèi)容也僅為簡要概述。確定驗證參數(shù)的方法很多，采用何種方法沒有具體限制。但是，驗證參數(shù)的限值常因確定方法的不同而發(fā)生變化。故此，確定驗證參數(shù)的實驗方法、實驗數(shù)據(jù)、計算方法等應(yīng)盡可能詳細(xì)地記述。

本文分析方法驗證中未包括驗證參數(shù)適應(yīng)性/牢固性(Robustness)的討論，這是由于牢固性的研究主要在分析方法的開發(fā)設(shè)計階段進(jìn)行，其研究結(jié)果可以在方法的分析條件或注意事項中得到體現(xiàn)。

2.1 真度/準(zhǔn)確度(Accuracy/Trueness)

2.1.1 定義：所謂準(zhǔn)確度，指分析方法所得測定值的偏離程度，通常以測定值的總平均值與真值之間的差來表示。

2.1.2 評價方法：準(zhǔn)確度一般以測定室內(nèi)重現(xiàn)精度或室間再現(xiàn)精度時所得總平均值與真值的差表示。真值一般使用理論值(如滴定法)，如果理論值不存在或即使存在但很難求出的情況下，可采用經(jīng)過確證或認(rèn)可的數(shù)值來代替(如制劑分析常以原料藥的測定值作為真值)。分析方法的專屬性強(qiáng)，可以推斷其分析方法的誤差就小。由推出的真值與室內(nèi)(室間)再現(xiàn)精度的標(biāo)準(zhǔn)偏差即可計算出真值的95%置信區(qū)間，并可判斷這個區(qū)間是否包括0點，或區(qū)間的上下限值是否在分析方法

1所要求的精度范圍之內(nèi)。

2.2 精密度(Precision)

2.2.1 定義：精密度是指從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個供試品進(jìn)行重復(fù)分析測定時，所得到的一系列測定數(shù)據(jù)彼此之間的一致程度。測定值的誤差以偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差、或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式表示。精度根據(jù)重復(fù)實驗的條件不同以三個水平表示，分別稱為：并行精度、室內(nèi)再現(xiàn)精度、室間再現(xiàn)精度。

并行精度(Repeatability/Intra-assayprecision)：指實驗室、實驗者、實驗日期、裝置、器具以及試藥的批號等實驗條件均未改變的情況下，從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個供試品短時間內(nèi)進(jìn)行重復(fù)分析測定時(并行條件)的精度。

室內(nèi)再現(xiàn)精度(Intermediateprecision)：指同一實驗室內(nèi)，實驗者、實驗日期、裝置、器具以及試藥的批號等實驗條件一部分或全部改變的情況下，從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個供試品進(jìn)行重復(fù)分析測定時(室內(nèi)再現(xiàn)條件)的精度。

室間再現(xiàn)精度(Reproducibility)：指在不同實驗室間，從均勻樣品中抽取的多個供試品進(jìn)行重復(fù)分析測定時(室間再現(xiàn)條件)的精度。

2.2.2 評價方法：首先，要保證精度研究所用樣品的數(shù)量和均勻性。溶液應(yīng)為均勻性樣品，在得不到均勻性樣品時，通常將大量制劑粉碎混合至認(rèn)為均勻或制劑的各組分混合至認(rèn)為均勻的樣品作為均勻性樣品使用。如果同時做兩個水平以上的精度評價時，可以采用諸如單因素方差分析等實驗方法，但為了正確得出分析方法的精度，必須有足夠的實驗次數(shù)、分析條件的水平數(shù)及實驗室數(shù)。并且要對可預(yù)想到的致使分析發(fā)生變化的要因進(jìn)行研究。各水平的精度以偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差、偏差的90%置信區(qū)間以及與其相對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的區(qū)間來表示。將其與分析方法所要求精度的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行對照，以確定分析方法是否可行。通常是以室內(nèi)(間)的再現(xiàn)精度作為方法取舍的依據(jù)。

2.3 專屬性/特異性(Specificity)

2.3.1 定義：專屬性指分析樣品中有共存物質(zhì)的情況下，對被測物質(zhì)進(jìn)行正確測定的能力，即表示分析方法的識別能力。如果分析方法的專屬性有個別缺陷，可以用其他方法加以補(bǔ)充。

2.3.2 評價方法：確證分析方法是否達(dá)到試驗?zāi)康?，確實能夠?qū)Ρ粶y物質(zhì)進(jìn)行鑒別或定量。例如，分析方法的專屬性可以通過比較A為僅含被測物質(zhì)樣品(陽性對照)；B為含有制劑的其他各組成成分及不純物或分解產(chǎn)物中添加被測物質(zhì)的樣品；C為不含被測物質(zhì)，僅含制劑的其他組分、不純物及分解產(chǎn)物的樣品(陰性對照)，根據(jù)A、B、C三種樣品的分析結(jié)果進(jìn)行評價。如果不純物不易得到時，可以用含有不純物的樣品(如經(jīng)時發(fā)生變化的樣品)替代。

2.4 檢出限界(Detection Limit)

2.4.1 定義：檢出限界是指樣品中所含的被測物質(zhì)可被檢出的最低量或濃度。在檢出限界內(nèi)并不意味著一定就能夠進(jìn)行定量。

2.4.2 評價方法：通常以消費者危險率及生產(chǎn)者危險率在5%以下來規(guī)定檢出限界。檢出限界可以通過空白樣品或檢出限界附近的樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差以及檢出限界附近的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率算出。例如，根據(jù)檢出限界附近的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率以及空白樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差，由下式求出檢出限界。

DL=3.3σ/slope

DL：檢出限界

σ：空白樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差

slope：檢出限界附近標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

應(yīng)用色譜法時，測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差可以用信噪比代替。分析方法的檢出限界應(yīng)比質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定值要小。

2.5 定量限界(Quantitation Limit)

2.5.1 定義：定量限界是指樣品中所含的被測物質(zhì)可被進(jìn)行定量的最小量或最低濃度。定量限界所述樣品測定值的精度，以相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，一般為10%。

2.5.2 評價方法：通常定量限界可以通過空白樣品或被測物定量限界附近的樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差以及定量限界附近的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率算出。例如，根據(jù)定量限界附近的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率以及空白樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差，由下式求出定量限界。

DL=10σ/slope

DL：定量限界

σ：空白樣品測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差

slope：定量限界附近標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

應(yīng)用色譜法時，測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差可以用信噪比代替。分析方法的定量限界應(yīng)比質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定值要小。

2.6 線性關(guān)系

2.6.1 定義：線性關(guān)系是指分析方法能夠得到與被測物質(zhì)的量或濃度具有直線關(guān)系的測定值的能力，必要時，被測物質(zhì)的量或濃度的測定值也可以是從數(shù)學(xué)公式中得到的變換值。

2.6.2 評價方法：準(zhǔn)備一系列不同濃度(量)的被測樣品，按照分析方法的操作步驟進(jìn)行測定，用測定值得到的回歸方程及相關(guān)系數(shù)對線性關(guān)系進(jìn)行評價。必要時，將測定值由回歸方程算出的殘差對被測物質(zhì)的量(濃度)作圖，不應(yīng)具有某種特定的趨勢。通常，采用5個不同量(濃度)的樣品作線性關(guān)系的研究。

2.7 范圍(Range)

2.7.1 定義：分析方法驗證中所述范圍是指具有一定精度和準(zhǔn)確度的被測物質(zhì)上限及下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。對于上述具有線性關(guān)系的分析方法則指：具有一定精度和準(zhǔn)確度，并且使線性關(guān)系成立的被測物質(zhì)上下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。

2.7.2 評價方法：分析方法驗證的范圍一般為標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定值的±20%左右，對范圍的上下限值及范圍中央值附近的樣品進(jìn)行精度、真度及線性的研究討論。

3、試驗分析方法的分類

根據(jù)試驗?zāi)康?，試驗方法主要可以分為以?種類型，各類型分析試驗方法的驗證所要求的驗證參數(shù)見表1。應(yīng)該指出，這僅是一個原則，評價分析方法所必需的驗證參數(shù)將隨分析方法的特點及試驗?zāi)康亩淖儭?/p>

表1 試驗類型與所要求的驗證參數(shù)

其一進(jìn)行評價，日本藥局方通常選擇后者進(jìn)行評價。

類型Ⅰ需做鑒別試驗，即對藥品中的主要成分及其特征進(jìn)行鑒別。類型Ⅱ需做檢查試驗，即對藥品中的雜質(zhì)或不純物的量進(jìn)行測定。類型Ⅲ需做含量測定和溶出度試驗，即對藥品中的成分進(jìn)行測定(成分包括穩(wěn)定劑、添加劑等)和藥品有效性試驗。

4、分析方法驗證用語

4.1 適應(yīng)性/牢固性(Robustness)指故意將分析條件在小范圍內(nèi)變化時，測定值不受影響的能力。例如，反應(yīng)的pH值、溫度、室間及試藥的量等分析條件在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)改變時，對測定值的穩(wěn)定性進(jìn)行研究討論。測定值對于分析條件不穩(wěn)定時，應(yīng)對方法加以改進(jìn)。適應(yīng)性的研究結(jié)果在分析方法中以表示分析條件的有效數(shù)字或注意事項的形式得以體現(xiàn)。

4.2 實驗室 指試驗進(jìn)行的場所、設(shè)施。分析方法驗證中所述改變實驗室是指試驗者、裝置以及試藥的批號等試驗條件發(fā)生變化。

4.3 試驗法 指藥局方中的試驗方法，例如鑒別試驗、檢查試驗等。試驗方法應(yīng)包括樣品的制備、規(guī)定值、分析方法等。

4.4 生產(chǎn)者危險率 指合格的制品由于試驗原因而錯判為不合格制品的發(fā)生概率。一般以α表示，也叫第一過失率，也就是在限度試驗中所說的假陽性率。

4.5 消費者危險率 指不合格的制品由于試驗原因而錯判為合格制品的發(fā)生概率。一般以β表示，也叫第二過失率，也就是在限度試驗中所說的假陰性率。

4.6 測定次數(shù) 指分析方法操作程序中規(guī)定的次數(shù)，為了提高分析方法的精度，有些試驗明確規(guī)定試驗次數(shù)在2次以上，分析方法驗證是對包括分析方法所規(guī)定的測定次數(shù)在內(nèi)的分析方法的評價。它與為了提高分析方法的精度進(jìn)行重復(fù)分析時的重復(fù)次數(shù)不同。

4.7 測定值 一次分析所得到的一個數(shù)值。

本文譯自第13版日本藥局方附錄參考資料3所載內(nèi)容。