第一篇：差熱分析在藥品質(zhì)量研究中的應(yīng)用范文

近年來，熱分析（Therma lanalysis，TA）廣泛應(yīng)用于藥品、食品、化妝品、陶瓷、紡織、航天等眾多研究領(lǐng)域中，特別是在藥品質(zhì)量研究過程中有其獨(dú)到之 處。據(jù)統(tǒng)計，在藥物研究領(lǐng)域中，熱分析的使用占10%~13%。不少國家已經(jīng)把熱 分析方法作為控制藥品質(zhì)量的主要方法，美國藥典、英國藥典、歐洲藥典與日本 藥局方均已經(jīng)將其作為法定方法收載。我國的2005年版《藥典》首次將熱分析收 入，并規(guī)定有關(guān)的新藥申報資料中必須要有熱分析的檢驗報告，因此熱分析方法 引起了業(yè)內(nèi)人士的日益重視。

那么熱分析具有什么樣的特點(diǎn)，一般都應(yīng)用在哪些領(lǐng)域？在實際的應(yīng)用中應(yīng) 該注意哪些問題？近日，記者就這些問題采訪了中國藥品生物制品檢定所的楊臘虎主任。

■便捷靈敏 優(yōu)勢突出

藥物在程序升溫的過程中，會表現(xiàn)出來熔融、晶態(tài)變化、分解等熱特征，對 進(jìn)行分析從而得出相關(guān)結(jié)果的過程就是熱分析，這種方法可分為差時掃描量熱法（DSC）和熱重分析法(TG)兩種。在藥品質(zhì)量研究中，熱分析一般用于晶型變化、熔點(diǎn)測定、相容性變化、最佳配方篩選、降解反應(yīng)過程、水分以及揮發(fā)物質(zhì)的檢

測等。

熱分析可以在較短的時間內(nèi)獲得需要復(fù)雜技術(shù)的或者長期研究才能得到的各 種信息。這種方法使用樣品量少，并且具有靈敏、快捷的特點(diǎn)。例如，對于藥品 穩(wěn)定性的測定，以前往往需要幾年的時間，而使用熱分析方法，在特定的溫度條 件下只要幾個月就可以了。

■應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大

近年來，熱分析應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大，目前在化學(xué)藥品對照品、中藥化學(xué)對照 品、生物化學(xué)藥品、藥用高分子材料、藥用輔料以及納米材料方面都能發(fā)揮很好的作用。

熱分析在藥物多晶型測定，水分的測定、降解物和穩(wěn)定性的測定以及最佳配 方篩選方面的應(yīng)用尤其突出：藥物的多晶型直接關(guān)系到療效，所以有關(guān)研究日益 受到人們的重視，而熱分析是測定藥物多晶型最有效的手段之一。相對于目前常 用的紅外光譜分析與X線衍射測晶型方法，熱分析方法不但可以測定藥物的多 晶型，還可以測得其晶型是單向性晶型還是可逆性晶型。藥物多晶型形成因素復(fù) 雜，溫度、濕度和壓強(qiáng)的改變都可以導(dǎo)致晶型的轉(zhuǎn)變。通過熱分析，借助于相關(guān) 公式，可以進(jìn)行晶型轉(zhuǎn)換的動力學(xué)計算，計算活化能和轉(zhuǎn)化速率。

藥物在合成過程中會殘留溶劑，可以用熱分析的方法檢測出來。熱分析方法 還可以檢測藥物中的水分，并判斷其為結(jié)合水還是吸附水或者結(jié)晶水。

根據(jù)熱分析的數(shù)據(jù)，可以判斷藥物的降解產(chǎn)物與穩(wěn)定性，對新藥研究與藥物 的再評價具有重要意義。熱分析方法可以用于多種反應(yīng)動力學(xué)研究，來反映藥品 的穩(wěn)定性。例如，檢測藥物與賦行劑之間的有否化學(xué)以及物理反應(yīng)是一個長期的 穩(wěn)定性實驗，熱分析可以大大加速它的進(jìn)程。

根據(jù)熱分析相圖，可以找到藥物的最佳配方，國外的新藥研究中常用此法。

另外，在生物制品方面，熱分析對細(xì)胞的相變、結(jié)晶水的測定、細(xì)胞分裂生 長速度的測定，熱分析能夠起到很好的導(dǎo)向作用。

第二篇：幸福感研究在企業(yè)管理中的應(yīng)用

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齊 齊 哈 爾 大 學(xué)

畢業(yè)設(shè)計（論文）

題 目： 幸福感研究在企業(yè)管理中的應(yīng)用

學(xué) 院： 教育與傳媒學(xué)院

專業(yè)年級：

學(xué)生姓名：

指導(dǎo)教師：

成 績：

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年 月 日

摘 要

目前，隨著社會和經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人們對于生活質(zhì)量的要求也在不斷提高，不再是以往的僅停留在物質(zhì)生活方面，目前目光更多的集中在精神生活層次。積極心理學(xué)也應(yīng)運(yùn)而生，幸福感是積極心理學(xué)中重要的研究領(lǐng)域。首先，本文通過對幸福感理論的研究，重點(diǎn)研究它的主要方面，即主觀幸福感，闡述主觀幸福感的含義、和特點(diǎn)；其次，介紹主觀幸福感的研究內(nèi)容、理論模型以及影響因素；最后將主觀幸福感理論研究與管理思想相結(jié)合，應(yīng)用于企業(yè)管理的實踐中，針對其影響因素，提出對人力資源管理方面的一些建議，以期為企業(yè)進(jìn)行人力資源工作提供參考和依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 幸福感 主觀幸福感 企業(yè)管理 人力資源

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Abstract

Now, with the rapid social and economic development, people's requirements for quality of life is improving, no longer the only remain in the material life, the current attention focused on the spiritual life more level.Positive psychology has come into being, happiness is an important positive psychology research.First, this paper studies the theory on happiness, focusing on its main aspects, namely the subjective well-being to explain the meaning of subjective well-being, and characteristics;second, introduced SWB research, theoretical models, and influencing factors;finalthe theory of subjective well-being of combining research and management thinking, applied to the practice of business management for the factors affecting the management of human resources a number of recommendations to human resources for the enterprise to provide information and evidence.Key words: Happiness Subjective Well Being Human Resources Management

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目 錄

摘要 ………………………………………………………………………………Ⅰ Abstract…………………………………………………………………………Ⅱ

一、緒論……………………………………………………………………………1

（一）選題背景及意義??????????????????????

（二）本研究價值????????????????????????

二、幸福感與主觀幸福感……………………………………………………………

（一）幸福感的含義及研究現(xiàn)狀???????????????????

（二）主觀幸福感????????????????????????? 主觀幸福感的含義?????????????????????? 2 主觀幸福感的研究現(xiàn)狀???????????????????? 3 主觀幸福感的相關(guān)理論????????????????????

（1）人格特質(zhì)理論???????????????????????

（2）目標(biāo)理論?????????????????????????

（3）判斷理論?????????????????????????

三、主觀幸福感與員工工作滿意度的關(guān)系…………………………………………

（一）主觀幸福感與員工滿意度???????????????????

（二）主觀幸福感與工作績效????????????????????

四、幸福感研究在企業(yè)管理中的應(yīng)用及案例分析…………………………………

（一）影響企業(yè)員工主觀幸福感的因素???????????????? 主觀因素?????????????????????????? 2 客觀素???????????????????????????

（二）激勵措施??????????????????????????

齊齊哈爾大學(xué)畢業(yè)設(shè)計（論文）建立積極的管理理念 ????????????????????? 進(jìn)行入職測評 了解企業(yè)員工的人格特質(zhì)????????????? 3 建立公平具有激勵性的薪酬制度????????????????

幫助員工完善其職業(yè)生涯規(guī)劃?????????????????

建立輕松良好的工作家庭關(guān)系?????????????????

提高員工的組織和職業(yè)的認(rèn)同感????????????????

（三）具體案例分析???????????????????????

五、研究的不足與展望…………………………………………………………… 參考文獻(xiàn)…………………………………………………………………………… 致謝…………………………………………………………………………………

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一、緒論

（一）選題背景及意義

社會在不斷進(jìn)步，經(jīng)濟(jì)在飛速發(fā)展，人們在關(guān)注物質(zhì)資料豐富的同時，更加注重精神層面的幸福。幸福感，成了越來越多的人關(guān)心的話題。在心理學(xué)意義上的幸福感不僅僅是個名詞，更演變?yōu)橐粋€心理學(xué)術(shù)語，用來衡量一個人的幸福程度，是個體對客觀存在的積極的主觀反映。幸福感，作為積極心理學(xué)最為重要的研究領(lǐng)域，對人們的工作、學(xué)習(xí)和生活都有著十分重要的影響。因此，對于幸福感的研究顯得尤為重要。

隨著人們思想的改變與進(jìn)步，企業(yè)在管理中也由過去注重效率，看重結(jié)果的死板模式，轉(zhuǎn)變進(jìn)而加強(qiáng)了對于人本身的關(guān)注。研究者們對于員工的理解從以往的“經(jīng)濟(jì)人”假設(shè)轉(zhuǎn)變?yōu)椤吧鐣恕奔僭O(shè)，近期也有學(xué)者提出“自我實現(xiàn)人”假設(shè)。幸福感正是針對人的內(nèi)心體驗和感知進(jìn)行的研究，在現(xiàn)在企業(yè)管理中有著十分重要的意義。

（二）本研究的價值

心理學(xué)中對于幸福感的研究，主要研究人們的幸福感指數(shù)；把有關(guān)幸福感研究的理論引入到企業(yè)管理的應(yīng)用實踐中，對于心理學(xué)理論研究和企業(yè)管理的實踐都具有重要的意義。許多專家學(xué)者通過研究證明幸福感相對于工作滿意度更能影響員工的工作積極性和工作績效。由此可見，有關(guān)幸福感的研究在企業(yè)管理中十分重要，尤其在人力資源規(guī)劃方面表現(xiàn)更為突出。這樣的研究對于心理學(xué)，特別是積極心理學(xué)是一種研究領(lǐng)域的創(chuàng)新和嘗試，而就企業(yè)而言，幸福的員工在工作中的表現(xiàn)是最好的，對于績效的提升、企業(yè)的進(jìn)步與發(fā)展都有益處。

雖然人們在進(jìn)行幸福感評價時使用的是自定的標(biāo)準(zhǔn)，在評價標(biāo)準(zhǔn)上可能存在差異，但是幸福感本身具有相對穩(wěn)定性。所以，通過對幸福感的理論研究，并將其應(yīng)用于企業(yè)管理中，分析影響員工幸福感的因素，采取相對性的措施對員工的幸福感進(jìn)行干預(yù)，可以影響員工的幸福感，進(jìn)而對工作績效產(chǎn)生影響，引起變化。但是，不同的文化背景、社會條件等對員工的幸福感有著不同程度的影響，而且不同群體的影響因素也不盡相同，所以有必要進(jìn)行更加深入的探索和研究。

所以本文將通過對于理論的分析、歸納和總結(jié)，結(jié)合當(dāng)前已有的國內(nèi)外先

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進(jìn)的研究成果，將幸福感理論研究同企業(yè)管理的實踐相結(jié)合，找到兩者的契合點(diǎn)，為我國企業(yè)提升員工的幸福感提出一些建議，同時為企業(yè)人力資源部門進(jìn)行人力資源規(guī)劃時提供參考和依據(jù)。

二、幸福感與主觀幸福感

積極心理學(xué)(positive psychology)是當(dāng)代心理學(xué)的兩個最新進(jìn)展之一[1]。積極心理學(xué)是與過去消極心理學(xué)(pathology psychology)相對的，旨在糾正過去心理學(xué)只關(guān)注病態(tài)心理、去除消極情感的傳統(tǒng)。積極心理學(xué)學(xué)者一致認(rèn)為，積極情感并不完全是消極情感的對立面，幸福并不等于沒有心理疾病。在這種心理學(xué)時代精神的倡導(dǎo)下，幸福感毋庸置疑的成為了積極心理學(xué)重要的研究領(lǐng)域，因為，其直接反映了人類追求美好生活的愿望。幸福是人人都向往，但是卻很少有人能闡釋清楚具體什么是幸福，這也是眾多研究者努力要弄清的問題。幸福感是積極心理學(xué)的重要研究領(lǐng)域，西方對于幸福感的研究主要可以分為主觀幸福感和心理幸福感兩大傳統(tǒng)，這兩種傳統(tǒng)分別源于兩種不同的哲學(xué)體系建立的。其中主觀幸福感是幸福感研究最重要的方面，也是研究者們最重視的主要方面。主觀幸福感以快樂論為基礎(chǔ)，認(rèn)為幸福由高興和快樂組成[ 2]。主觀幸福感專指評價者根據(jù)自定的標(biāo)準(zhǔn)對其生活質(zhì)量的整體性評估，對于主觀幸福感的操作性定義，大多數(shù)研究者認(rèn)同主觀幸福感由三部分組成：積極情感、消極情感和生活滿意度。

（一）幸福感的含義及研究現(xiàn)狀

心理學(xué)意義上的幸福感，主要是指人們對自己的生活狀況進(jìn)行整體的評價，并由此而產(chǎn)生的積極性情感占優(yōu)勢的心理狀態(tài)，是人類個體認(rèn)識到自己需要得到滿足以及理想得以實現(xiàn)時而產(chǎn)生的一種情緒體驗，是有需要、認(rèn)知、情感等心理因素與外部誘因的交互作用形成的一種復(fù)雜的、多層次的心理表現(xiàn)。當(dāng)個體處于幸福感體驗中時，其體驗到較多的愉快和較少的不快，從而提高人們的工作、學(xué)習(xí)和生活的效率。幸福感是人們對客觀現(xiàn)實的主觀反映。它既同人們生活的客觀條件密切相關(guān)，又體現(xiàn)了人們的需求和價值取向。一方面，幸福感不能脫離幸福的生活事件而存在，它具有客觀性；另一方面，幸福的生活事件只有被個體感知和體驗才有意義，它又具有主觀性。

幸福感的研究興起于20世紀(jì)50年代的美國。經(jīng)過50多年的發(fā)展，關(guān)于幸福感的研究大致經(jīng)歷如下三個階段：第一階段是以外界標(biāo)準(zhǔn)界定的幸福感。該階段判斷幸福感的標(biāo)準(zhǔn)是以研究者的角度來界定的，只強(qiáng)調(diào)外在的判斷，忽略研究對象本身的個人感知和內(nèi)心體驗。第二階段是以個體的內(nèi)在情緒體驗作為判斷標(biāo)準(zhǔn)的幸福。這種觀點(diǎn)雖然已經(jīng)將對于幸福感的理解提升到主觀體驗的高度，但是由于對幸福感組成各個部分關(guān)系的研究不充分,具有一定的局限性。第三階段以個體的主觀體驗作為界定幸福感的標(biāo)準(zhǔn)。這種觀點(diǎn)強(qiáng)調(diào)幸福感是評價者依據(jù)自己的標(biāo)準(zhǔn)對其生活質(zhì)量的一種整體評價，本論文關(guān)于幸福感的研究就是基于這一理論。

幸福是人們快樂的心理體驗，屬于主觀意識范疇，隨著人們自己的主觀感覺體驗的變化而變化。主觀幸福感是幸福感研究的一個主要方面，近五十年來

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積極情緒領(lǐng)域研究的重點(diǎn)都集中在主觀幸福感上。本文以主觀幸福感為主要研究對象進(jìn)行深入探討，闡述其含義、理論模型及影響因素，將對主觀幸福感的研究應(yīng)用到企業(yè)管理的實踐中。

（二）主觀幸福感

1.主觀幸福感的含義

主觀幸福感是評價者根據(jù)自定的標(biāo)注對其生活質(zhì)量的整體性評估。它是一種主觀的、整體的概念，同時也是一個相對穩(wěn)定的值，是評估長期的情感反應(yīng)和生活滿意度。主觀幸福感將幸福等同于對生活質(zhì)量的評價，把幸福感還原為生活質(zhì)量，認(rèn)為幸福是對當(dāng)前和過去生活的評估。在心理測量中，常用主觀幸福感作為反映某一種社會中個體生活質(zhì)量的重要心理學(xué)參數(shù)[3]。從結(jié)構(gòu)上講，它包含三方面的內(nèi)容：積極情緒，如愉悅、高興、快樂、興奮等情緒體驗；消極情緒，如抑郁、憂慮、厭煩、傷心等情感體驗；認(rèn)知評價，即對于生活滿意程度，指個體建構(gòu)出一個與自己相吻合的標(biāo)準(zhǔn)，并將生活的諸多方面作為一個整體來評定自己的滿意感程度。Diener認(rèn)為幸福感概括的講具有三個明顯的特點(diǎn)：（1）主觀性。幸福感的評定主要依賴于個體本人設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)，而不是他人或外界的標(biāo)準(zhǔn)，一個人是否覺得幸福只有自己的內(nèi)心體驗最為真實準(zhǔn)確，因此幸福感具有極強(qiáng)的主觀性。（2）整體性。幸福感是一種綜合評價，它包括對情感反應(yīng)的評估和認(rèn)知判斷，既包括正向情感、負(fù)向情感和生活滿意度三個維度，反映的是個體作為整體的主觀評價，是一種綜合性的心理指標(biāo)，所以具有綜合性。（3）相對穩(wěn)定性。幸福感主要評定長期而非短期情感反應(yīng)和生活滿意度，是一個相對穩(wěn)定的參數(shù)。雖然在評定幸福感是會受到情景和情緒狀態(tài)的影響，其情緒水平會發(fā)生變化，但是長期的幸福感還是相對趨于穩(wěn)定。

2.主觀幸福感的研究現(xiàn)狀

幸福是個古老的話題，伊壁鳩魯?shù)膫惱韺W(xué)說就認(rèn)為：“快樂是生活的目的，是天生的最高的善，我們的一切取舍都應(yīng)從快樂出發(fā)，我們的最終目的乃是得到快樂?！敝饔^幸福感這一概念是由Dodge 在20 世紀(jì)30年代提出的,對主觀幸福感進(jìn)行研究開始于20 世紀(jì)50 年代的美國。其研究背景主要有兩個方面,一是二戰(zhàn)后美國人民生活水平的不斷提高, 二是健康心理學(xué)的崛起。由于主觀幸福感是社會進(jìn)步的深層尺度,即社會的進(jìn)步表現(xiàn)在政治、經(jīng)濟(jì)、文化的進(jìn)步,但是最終要回歸到人的心理層面。20世紀(jì)60年代，當(dāng)時威爾森（W.Wilson）發(fā)表了他的博士論文：《自稱幸福的相關(guān)因素》[4]，這是第一篇關(guān)于主觀幸福感科學(xué)研究的文章。該文指出了主觀幸福感個體差異的兩個理論假設(shè)：一是如果需要能夠及時得到滿足，將產(chǎn)生快樂；如果需要總是得不到滿足，將導(dǎo)致消極情緒的出現(xiàn)；二是個人的期望水平?jīng)Q定了需要滿足到何種程度能夠帶來快樂，價值觀、過去的經(jīng)驗、與他人的比較等其他因素對此都有影響。1984年，Diener區(qū)分了影響主觀幸福感的外部與內(nèi)部因素。早期理論建構(gòu)重點(diǎn)在于證明外部因素如事件、情境和人口統(tǒng)計項目等是如何影響主觀幸福感的。這一理論是基于威爾森的第一個理論假設(shè)。許多研究支持這一理論，但是有更多的研究表明外在、客觀的變量對主觀幸福感的影響相當(dāng)小，人口統(tǒng)計項目只能解釋主觀幸福

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感不足20%的變化，外在環(huán)境只能解釋主觀幸福感變化的15%[5]。由于外部因素影響較小，研究者們將視線轉(zhuǎn)移到內(nèi)部因素的研究中，及威爾森的第二個假設(shè)：個人內(nèi)部建構(gòu)決定生活事件如何被人所感知，進(jìn)而影響個體的幸福體驗。綜合來講，西方心理學(xué)對于幸福感的研究主要分為三個階段：第一，描述性研究階段。這一階段的時間是從20世紀(jì)50年代開始一直到70年代。在此階段各研究定義了幸福感的緯度，Andrews和Withey（1976）認(rèn)為主觀幸福感同時包括認(rèn)知和情感兩個維度；包括三個基本成分：積極情感、消極情感和生活滿意度[4]。后來的研究認(rèn)為消極情感和積極情感并不是同一緯度相對的兩端，而是兩個相對獨(dú)立的維度。另外，這一階段的大部分研究側(cè)重于影響幸福感的外部因素如生活事件、情境和人口統(tǒng)計項目等是如何影響幸福感的。第二，理論建構(gòu)階段。20世紀(jì)70年代，幸福感的研究進(jìn)入了理論建構(gòu)階段。隨著對主觀幸福感理論構(gòu)成的觀點(diǎn)逐漸統(tǒng)一，研究者們開始把研究方向從研究幸福感的構(gòu)成轉(zhuǎn)向了研究影響幸福感的因素。早期對于幸福感的研究主要集中在討論影響幸福感的客觀因素上，著眼于性別、年齡、收入、教育程度等人口統(tǒng)計變量、情境及婚姻狀況等對幸福感的相關(guān)性研究。而結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這些對于幸福感的影響較小。隨后對于幸福感的研究集中到了影響幸福感的主觀因素，主要是人格特征方面。在理論建構(gòu)階段，由于研究角度不同，形成了各種流派和觀點(diǎn)。主要有狀態(tài)理論、人格理論、判斷理論、目標(biāo)理論、活動理論、動力平衡理論等。第三，實證性研究階段。自20世紀(jì)90年代以來，幸福感研究的重點(diǎn)集中在對幸福感的測量，探討如何提高人們的幸福感。對于幸福感測量的研究方向主要有兩種：一種是對生活質(zhì)量意義上的幸福感測量，這類研究將幸福感定義為人們對自身生活的滿意程度的評價；另一種研究取向是心理健康意義上的幸福感測量，它與積極心理學(xué)和健康心理學(xué)密切相關(guān)。近年來，心理學(xué)研究者開始運(yùn)用幸福感的測量理論來整合各種方法，并開展了大規(guī)模的跨文化研究。

我們國家是在上世紀(jì)八十年代，才開始興起針對幸福感的研究，大多是綜述性的研究，主要是對國外研究進(jìn)行介紹、整合，實證研究還處于逐步開展的階段。從理論建構(gòu)上看我國學(xué)者多數(shù)認(rèn)同Diener等學(xué)者提出的幸福感的概念。在幸福感測量方面，我國學(xué)者現(xiàn)在有的研究主要使用引進(jìn)的測量幸福感的量表?，F(xiàn)今比較流行的測量量表有生活滿意度量表、費(fèi)城老年中心信心量表、總體幸福感量表以及情感量表等。這些量表在我國都得到了廣泛的應(yīng)用，為我國幸福感的研究作出了很大的貢獻(xiàn)。

3.主觀幸福感的相關(guān)理論

由于針對主觀幸福感研究的角度不同，形成了各種不同的觀點(diǎn)，概括地說有以下幾種：

（1）人格特質(zhì)理論

主觀幸福感是一種主觀的心理體驗，客觀的外界因素往往是通過主觀加工而起的作用。不同的人對相同的外在條件可能會產(chǎn)生不同的幸福感，其主要原因就是人格特質(zhì)的差異。人格因素如果說不是SWB 最好的預(yù)測指標(biāo)至少也是最可靠最有力的預(yù)測指標(biāo)之一[6]，許多研究證實了這一點(diǎn)。

Heady發(fā)現(xiàn)[7] ：人格影響生活事件進(jìn)而影響主觀幸福感。人格由于其內(nèi)在

齊齊哈爾大學(xué)畢業(yè)設(shè)計（論文）的人格結(jié)構(gòu)作用，是一個長期影響的強(qiáng)烈因素。具有“幸福圖式”的人，對環(huán)境和生活事件傾向于以積極的方式來看待和處理，擁有更健康的情緒和更樂觀的期望，所以其幸福感水平相對而言較高。Gray 在20 世紀(jì)70 年代提出了預(yù)測內(nèi)外向和神經(jīng)情感易感性的理論。他認(rèn)為人類有兩個動機(jī)系統(tǒng): 行為抑制系統(tǒng)(通過懲罰調(diào)節(jié)行為)和行為激活系統(tǒng)(通過獎勵調(diào)節(jié)行為)。不同的人對獎懲的感受不同。外向的人對正性情感敏感, 非神經(jīng)質(zhì)及穩(wěn)定性的個體對負(fù)性情感不敏感, 這兩類人的幸福感較高。Costa和McCrae（1982,1991）對于大五人格的研究是以人格五因素理論為指導(dǎo)，即外傾性、神經(jīng)質(zhì)、經(jīng)驗的開放性、隨和性和盡責(zé)性[8]。研究表明[6]：外傾（E）與積極情感和生活滿意度有關(guān)，與負(fù)性感情無關(guān)，因而提高主觀幸福感水平；神經(jīng)質(zhì)（N）與消極情感穩(wěn)定的相關(guān)，從而降低主觀幸福感。隨和性和盡責(zé)性通過創(chuàng)造使人快樂的環(huán)境及生活事件而影響這人們幸福感的體驗，與生活滿意度和積極情感存在顯著正相關(guān)，與消極情感存在顯著負(fù)相關(guān)[9]。Lucas, Diener, Grob,Suh和Shao的跨文化研究發(fā)現(xiàn), 外向者對正性情感敏感, 非神經(jīng)質(zhì)及穩(wěn)定的個體對負(fù)性情感不敏感。

（2）目標(biāo)模型

Emmons發(fā)現(xiàn)，當(dāng)實現(xiàn)其特定目標(biāo)時，人們會產(chǎn)生積極情緒體驗。Oishi，Diener,Suh和Lucas認(rèn)為目標(biāo)是幸福感的調(diào)控裝置，人們的主觀幸福感取決于人們的目標(biāo)以及價值取向[10]。所謂目標(biāo)，就是個體行為的內(nèi)在目標(biāo)狀態(tài)，而價值，就是生活的取向原則，可以視為高層次的目標(biāo)。目標(biāo)理論所關(guān)注的核心是主觀幸福感的個體差異與發(fā)展性的變化。例如，將自己的人生價值定位于在工作崗位上實現(xiàn)自我價值的人，在工作中得到發(fā)展，發(fā)揮潛能時會感到幸福感；喜歡物質(zhì)獎勵的員工，發(fā)獎金一定是最好的激勵辦法。

目標(biāo)理論認(rèn)為主觀幸福感產(chǎn)生于需要的滿足和目標(biāo)的實現(xiàn)。目標(biāo)模型的基本假設(shè)是：目標(biāo)和價值取向決定人的幸福感，是人們獲得與維持主觀幸福感的主要來源。個體目標(biāo)與價值取向的差異是人們感受和體驗幸福感不同的主要原因[11]。目標(biāo)是個人確定的標(biāo)準(zhǔn)和準(zhǔn)則，反映了人們情感系統(tǒng)的參照標(biāo)準(zhǔn)，目標(biāo)的達(dá)成程度影響人們的幸福感。目標(biāo)的定義、實現(xiàn)目標(biāo)的過程和目標(biāo)的達(dá)成及目標(biāo)的達(dá)成結(jié)果都影響個人情感和生活滿意度。同時目標(biāo)必須與人的內(nèi)在動機(jī)聯(lián)系在一起，當(dāng)一個人能以內(nèi)在價值和自主選擇的方式來追求目標(biāo)并獲得一定程度的成功時，才能真正提高其主觀幸福感。生活中，目標(biāo)使人感到生活的意義，并產(chǎn)生自我效能感。同時，努力實現(xiàn)目標(biāo)的過程幫助人們有效地應(yīng)對各種日常生活問題，使人在社會和困境中保持良好狀態(tài)。目標(biāo)通過自我效能感這一中介變量來影響幸福感。成功的體驗將使人更加自信，建立強(qiáng)大的自我效能感，從而提高人們的主觀幸福感體驗。

目標(biāo)理論還有一個重要假設(shè)：，目標(biāo)與個人生活背景相適應(yīng)，才能提高主觀幸福感水平。生活背景重要組成部分之一就是個人生活的文化背景。Cantor和Sanderson認(rèn)為：當(dāng)個人實現(xiàn)被其文化或亞文化高度評價的目標(biāo)時，主觀幸福感會增加；文化影響人們選擇個人目標(biāo)，從而成為影響主觀幸福感的因素之一[12]。造成人們主觀幸福感的情緒體驗差異的特殊文化維度是：個人——集體主義。對于主觀幸福感的跨文化研究顯示，集體主義文化鼓勵群體成員相互支持和依賴，在群體中保持和諧的人際關(guān)系，強(qiáng)調(diào)社會責(zé)任感。因此，集體主義文化中個體的主觀幸福感更多的取決于和諧的人際關(guān)系、社會職責(zé)的完成和期

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望的實現(xiàn)；而個人主義文化中的個體的主觀幸福感往往來自于自尊、自豪感以及個人目標(biāo)的達(dá)成。

（3）判斷理論

Michalos（1985）借用古希臘哲學(xué)家、Wilson和Campbell等人的主張，提出滿意度的多種差異：個人與多種標(biāo)準(zhǔn)（過去情況、期望值、他人、滿意感理想水平、目標(biāo)或需要）作向下（比較標(biāo)準(zhǔn)低于現(xiàn)實條件）和向上（比較標(biāo)準(zhǔn)高于現(xiàn)實條件）比較必然產(chǎn)生差異，向下比較主觀幸福感水平提高，反之則降低。判斷標(biāo)準(zhǔn)主要有以下兩種：一是社會比較理論，Wood在1996年將社會比較定義為：“想到與自我有關(guān)的友好或多個他人的信息的過程”。社會比較過程包括三個內(nèi)容，即獲得社會信息、思考或比較社會信息和對社會比較作出的反應(yīng)，包括認(rèn)知、行為和情感反應(yīng)；二是期望值理論，Wilson（1967）指出高期望值對感知幸福感是一個主要的威脅?，F(xiàn)今的觀點(diǎn)一般認(rèn)為：期望值和實際成就之間的差異與主觀幸福感有關(guān)，高期望值與個體的實際差距過大會使人喪失信心和勇氣；期望值過低會使人感到厭煩。期望值本身并不是衡量主觀幸福感的好的預(yù)測指標(biāo)，而期望值、現(xiàn)實條件與個人內(nèi)在資源（外貌、氣質(zhì)等）和外在資源（經(jīng)濟(jì)狀況、社會關(guān)系、地位等）是否一致，可以作為主觀幸福感的預(yù)測指標(biāo)。[13]

三、主觀幸福感與員工工作滿意度的關(guān)系

工作滿意度是人們在工作過程中形成的一種主觀上的心理感受式意識形態(tài)，實質(zhì)上是態(tài)度問題。工作滿意感是指個體對所從事的工作的滿意程度，是人們對所從事工作的感情反應(yīng)，它受個人價值取向的影響，每個員工對此都有自己的評判標(biāo)準(zhǔn)。人們普遍認(rèn)為，提高員工的工作滿意度可以提高工作熱情，提升工作效率，降低員工流失率，進(jìn)而增強(qiáng)企業(yè)的競爭力和實力。因此，企業(yè)在進(jìn)行人力資源工作中對如何讓員工提升對工作的滿意度十分重視。之前的研究將主觀幸福感與工作滿意度相等同，這樣的看法有失偏頗。工作滿意度高的員工不一定是快樂的，因為，除了工作還有很多因素在影響著主觀幸福感，簡單的將兩者畫上等號是不太合理的。

（一）主觀幸福感和員工滿意度

工作滿意度是個體對所從事的工作環(huán)境因素的滿足感的內(nèi)心體驗，是對工作情景的主觀反映。主觀幸福感是個體依據(jù)一定的標(biāo)準(zhǔn)對其生活質(zhì)量的整體的綜合性的評價，也是一種主觀的心理感覺。主觀幸福感由認(rèn)知成分和情感成分兩部分構(gòu)成。認(rèn)知成分指的是生活滿意度，情感成分包含積極情感和消極情感。其中積極情感包括生活和工作領(lǐng)域滿意、快樂、愉快這些積極的情感體驗。兩者都是個體的內(nèi)心情緒的體驗，不同的是，工作滿意度僅僅只涉及工作領(lǐng)域內(nèi)的情感；而主觀幸福感不只包含工作方面的情緒，還有生活、人際關(guān)系、社會文化等方面的情緒情感體驗，工作滿意度確實可能在一定程度上影響員工的情緒進(jìn)而影響員工的工作熱情和工作績效。但是，個體的情緒情感還可能受到更多方面的影響，所以說，工作滿意度是主觀幸福感的一個方面。

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（二）員工主觀幸福感與工作績效的關(guān)系

一個人的情緒情感勢必要影響他生活的全部，其中當(dāng)然也包括工作。有證據(jù)表明主觀幸福感較高的工作者相比主觀幸福感較低的工作者，更加具有優(yōu)勢。主觀幸福感體驗較多的人，更容易產(chǎn)生積極情緒，更能夠樂觀的理解生活情境和環(huán)境因素，他們相對于主觀幸福感較低的人更具有活力和熱情。在工作中，更容易贏得面試，更多的受到上司的表揚(yáng)，更多的晉升機(jī)會，也比較少出現(xiàn)工作倦怠。Cropanzano、Wright和Staw的研究說明了工作幸福感和工作績效不但顯著相關(guān)，而且前者對后者具有影響作用[14]。還有學(xué)者認(rèn)為快樂之所以能夠在工作中發(fā)揮積極的作用，是因為積極的情感對于人的生理、智力和社會資源等方面具有拓展作用，這些資源的豐富可以讓人增加面臨威脅的勇氣和信心，激勵人們更好的抓住機(jī)遇，富有熱情，進(jìn)而影響并提高工作績效，增加公民的組織行為，降低消極情感出現(xiàn)的頻次，以及缺席率和離職率。

四、幸福感研究在企業(yè)管理中的應(yīng)用及案例分析

（一）影響企業(yè)員工主觀幸福感的因素

幸福感是人的主觀心理體驗，影響人們感知幸福感的主要因素有主觀和客觀兩方面。因為心理體驗是一種心理過程，與個體的主觀意識緊密相關(guān)，而且主觀幸福感的建立依賴于個體自己所構(gòu)建的價值標(biāo)準(zhǔn)體系，它是隨著個人標(biāo)準(zhǔn)的不同而變化的。因此，個體的主觀因素對主觀幸福感的影響是不容忽視的。同時，主觀幸福感又是個體對客觀實在的主觀反映。這就說明主觀幸福感即是主觀的，也是客觀的，也不可避免的受到客觀因素的影響，如文化、社會環(huán)境等方面的差異。本文從主觀因素和客觀因素兩方面進(jìn)行探討。

1.主觀因素

（1）人格特質(zhì)

人格是人在社會化的過程中形成的思想、情感及行為的特有統(tǒng)合模式，包括個體獨(dú)立而穩(wěn)定的特質(zhì)或特點(diǎn)[15]。從一些研究的結(jié)果來看，人格特質(zhì)一種有效預(yù)測主觀幸福感的重要因素。20世紀(jì)80年代，克斯塔（A.Costa）和麥克瑞（R.McCrae）發(fā)現(xiàn)，積極情感、消極情感和生活滿意感分別對應(yīng)著人格特質(zhì)中的神經(jīng)質(zhì)（N）和外傾（E）特質(zhì)；這說明，與其他因素相比，就主觀幸福感產(chǎn)生的穩(wěn)定性的特征來看更多的依賴與人格特質(zhì)，還可以對十年甚至二十年的主觀幸福感進(jìn)行預(yù)測。大五人格中的兩個特質(zhì)對主觀幸福感具有重要影響。神經(jīng)質(zhì)和消極情感之間、外傾和積極情感之間分別有著不同的聯(lián)系，神經(jīng)質(zhì)的個體對消極情感的反應(yīng)強(qiáng)于積極情感；而外傾的個體對積極事物的反應(yīng)強(qiáng)于消極事物的反應(yīng)，跟容易受到正面、積極的事物影響而產(chǎn)生積極的情緒體驗。除了上述的人格特質(zhì)以外，已得到證實的與主觀幸福感相關(guān)的人格特質(zhì)還有樂觀、自尊等。有研究者指出，樂觀者更加期待生活中出現(xiàn)有利結(jié)果而且會朝向自己設(shè)定的目標(biāo)來努力，這種行為模式使得樂觀者比悲觀者更能夠順利的

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達(dá)到目標(biāo)；高自尊的個體更多的時候以積極的心態(tài)看待自己，同時高自尊個體傾向于改變情境，能夠更好的應(yīng)對各類問題和困境，從而產(chǎn)生積極情緒，體驗幸福感。

（2）自我效能

自我效能是對行為操作能力的知覺和有關(guān)恪守自我生成能力的信念，人們通過它可以對技能進(jìn)行權(quán)衡和判斷，也可以對自己的思想加以評價和改變[16]。1982年，社會學(xué)習(xí)論的創(chuàng)始人班杜拉最早提出了自我效能感這一概念，用以解釋在特殊情境下產(chǎn)生動機(jī)的原因，是指人們主觀判斷自己能否成功完成某一成就的行為。自我效能是個人對其工作能力的自我評估，是人們對在某一特定的情境中組織和運(yùn)用行動的能力的信念，在形態(tài)上表現(xiàn)為個人因素、行為方式和環(huán)境因素三部分相互作用和影響的三段交互決定論模型[17]。國內(nèi)佟月華、余鵬等的研究發(fā)現(xiàn)[18]，一般自我效能感、積極應(yīng)對與主觀幸福感之間存在顯著正相關(guān)。說明一般自我效能感越高，以樂觀積極心態(tài)和行為方式對待生活事件的可能性就更高，因而對于幸福感的體驗就會更強(qiáng)烈，生活滿意度也會更多。

（3）心理控制源

有關(guān)主觀幸福感與心理控制源的研究，一般認(rèn)為內(nèi)控者相對于外控者的主觀幸福感較高些。如果人們認(rèn)為不良的生活事件是不可控的，即心理控制源為外控者，則更容易產(chǎn)生消極情緒，從而降低幸福感體驗；內(nèi)控者則能夠更好的針對消極事物采取應(yīng)激辦法，通過改變情景來提升主觀幸福感。

2.客觀因素

（1）經(jīng)濟(jì)因素

關(guān)于收入和主觀幸福感的相關(guān)研究的有兩個方面：國家內(nèi)和國家間。國家內(nèi)的許多研究發(fā)現(xiàn)，收入與幸福感相關(guān)呈正向。其原因是因為較高的收入和財富會帶來更高的權(quán)利、地位和物質(zhì)享受，并隨之產(chǎn)生優(yōu)越感，使高收入者幸福感體驗增加；國家間對于收入與幸福感相關(guān)的研究多數(shù)處于宏觀層面，一般將國際通用經(jīng)濟(jì)指數(shù)作為國家財富的指標(biāo)，主觀幸福感的水平則是國家平均水平，總體來說，富裕國家的人們幸福感水平較高。因此，在企業(yè)管理中，薪酬的設(shè)計和管理對于員工主觀幸福感的影響是不容忽視的。

（2）文化和社會支持因素

人不是獨(dú)立生活的個體，而是居住在不同的社會環(huán)境中，必然要受到不同社會文化背景的影響。在不同的文化中生活的個體，在生活滿意度、價值取向、情感體驗、判斷準(zhǔn)則等方面存在差異。這就要企業(yè)在進(jìn)行人力資源工作中，將文化作為影響員工主觀幸福感的重要因素考慮進(jìn)去。例如在集體主義文化（如中國），人們較注重社會責(zé)任感、集體榮譽(yù)感、人際和諧等因素。社會支持是集體主義文化中衡量主觀幸福感的重要維度之一，有研究證實，在集體主義文化氛圍中，社會支持與主觀幸福感成正相關(guān)。

（3）工作和家庭因素

工作是人們生活的重要組成部分，其影響地位不容忽視。對于企業(yè)的員工，齊齊哈爾大學(xué)畢業(yè)設(shè)計（論文）

工作包含了諸多可以影響主觀幸福感的因素，如工作性質(zhì)、工作地位、工作報酬、同事關(guān)系、肯定與晉升的機(jī)會等。當(dāng)員工在一個崗位上，感到充分發(fā)揮了自己的才干，同時得到了應(yīng)有的物質(zhì)回報和積極的情感體驗，其主觀幸福感就會較高。Meyer等人發(fā)現(xiàn)組織承諾與主觀幸福感的消極情緒因素存在負(fù)相關(guān)，主觀幸福感的認(rèn)知因素和情感因素都對工作滿意度組織承諾有顯著作用[18]。家庭是伴隨每一個體成長的重要環(huán)境，家庭對與一個人主觀幸福感的影響從出生到死亡一直都存在。在嬰幼兒到青少年階段，家庭對于人格的形成和確立有著十分重要的影響，而人格又是影響主觀幸福感的重要因素。在工作家庭關(guān)系中，工作家庭沖突對于員工的主觀幸福感有負(fù)性影響；而工作家庭關(guān)系的積極方面會在一定程度上提升員工的主觀幸福感，而且這種作用是相互的，積極家庭因素和主觀幸福感是相互促進(jìn)的關(guān)系。

（4）自我實現(xiàn)

美國心理學(xué)家馬斯洛提出了非常著名的需要層次理論，他認(rèn)為人具有五個層次的需要：生理需要、安全的需要、歸屬和愛的需要、尊重的需要以及自我實現(xiàn)的需要。這五個層次逐步遞進(jìn)的，自我實現(xiàn)是最高層次的需要。員工在工作中，為了實現(xiàn)自己的價值，會自我激勵保持良好的積極心態(tài)，追求更高的目標(biāo)，充分發(fā)揮他們的潛能，在自我實現(xiàn)的過程中，感知和體驗幸福。反之，當(dāng)員工看不到自己的前途，實現(xiàn)不了應(yīng)有的價值時，會導(dǎo)致離職。

（二）激勵措施

理論的研究是為了實際應(yīng)用而服務(wù)的。在針對影響企業(yè)員工主觀幸福感因素的研究中，可以看出企業(yè)可以從多個角度來影響和提升員工的主觀幸福感，進(jìn)而提高其工作績效，更好地為企業(yè)創(chuàng)造利益和價值，增強(qiáng)企業(yè)的綜合競爭力和實力。下面從五個方面論述如何干預(yù)和影響員工的主觀幸福感。

1.建立積極的管理理念

個體選擇工作的一個很重要的原因是因為這項工作給他帶來相應(yīng)的滿足感，不僅僅是金錢的回報，因此，在企業(yè)管理中，管理者應(yīng)該建立積極的管理理念，改變以往認(rèn)為只要有足夠的物質(zhì)報償就可以讓企業(yè)員工為企業(yè)盡心盡力的傳統(tǒng)觀念，而將員工的主觀幸福感放在管理的第一位，把提升員工的主觀幸福感正是當(dāng)代積極管理理念的核心。需要建立積極管理理念的當(dāng)仁不讓的應(yīng)是當(dāng)代企業(yè)的管理者。作為當(dāng)代的管理者，應(yīng)該成為一位極有變革精神的領(lǐng)導(dǎo)。變革型領(lǐng)導(dǎo)概念是1978年伯恩斯（J.M.Burns）基于對各種政治領(lǐng)導(dǎo)人的類型進(jìn)行描述性分析后，在其著作《領(lǐng)導(dǎo)力》中首次提出的[19]。所謂變革型領(lǐng)導(dǎo)就是指領(lǐng)導(dǎo)者通過員工意識到自己所承擔(dān)任務(wù)的重大意義和責(zé)任，并激發(fā)員工的高層及需求或擴(kuò)展員工的需要和愿望，從而使員工為了團(tuán)隊、組織和更大的政治利益超越個人利益[20]。變革型領(lǐng)導(dǎo)要將企業(yè)員工的需要和目標(biāo)提升到一個更高的層次，通過領(lǐng)導(dǎo)者個人的信念、價值取向以及熱情來感染、激勵、鼓舞員工，促進(jìn)員工優(yōu)秀品質(zhì)的充分發(fā)揮，提升員工的積極情緒體驗，進(jìn)而提高其幸福感。

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2.進(jìn)行入職測評 了解企業(yè)員工的人格特質(zhì)

人格特質(zhì)是影響主觀幸福感的重要因素，不同的人格特質(zhì)對于個體的工作態(tài)度與工作狀態(tài)有著不同的影響，對于相同的工作，不同人格特質(zhì)的個體也會有不同的處理方式。不同性質(zhì)的工作，要求的人格特質(zhì)也不盡相同。如技術(shù)精密的工作對于外傾性特質(zhì)要求較低；對于銷售工作，則要求外傾性特質(zhì)較高的員工，善于并熱衷于人際交往。因此，在人力資源部門進(jìn)行招聘以及人員工的分配上，對于人格特質(zhì)的測評顯得尤為重要。

人格特質(zhì)對于工作來講并無好壞之分，在人力資源管理工作中，讓合適的人處于適合的工作崗位上，才能發(fā)揮員工最大的潛能，把工作做好，員工也在工作中得到樂趣。所以，對于不同的工作進(jìn)行區(qū)分，分析工作性質(zhì)，找到并制定出相對應(yīng)的更能出色勝任的人格特質(zhì)模型。在招聘和分配的工作中，對個人的人格特質(zhì)進(jìn)行測評，將人格特質(zhì)與工作性質(zhì)進(jìn)行匹配，找到最能勝任此工作的人格個體，進(jìn)而激發(fā)員工最大的工作興趣和潛能，發(fā)揮最大的工作效能，實現(xiàn)績效的最大化。

3.建立公平具有激勵性的薪酬制度

前面已經(jīng)闡述過收入對于員工主觀幸福感的影響，所以企業(yè)可以從薪酬的設(shè)計和管理上著手，提升員工的主觀幸福感。

完善的薪酬體系需要一個合理全面的績效考核體系作為基礎(chǔ)，方便對員工在其工作崗位上的行為表現(xiàn)和結(jié)果進(jìn)行評價。合理的績效考核，不但能對每位員工對組織的貢獻(xiàn)和不足作出評價，監(jiān)督員工的工作情況，還可以為薪酬制度的制定提供參考和依據(jù)，這對于提升員工士氣、工作績效，提高員工的工作滿意度具有非常重要的意義。所以，首先應(yīng)當(dāng)做的是建立合理有效的績效考核體系。薪酬是激勵員工的眾多方法中使用最為普遍也最為直接的一種。薪酬制定的方式不同，由此所產(chǎn)生的激勵效果也不相同。在制定薪酬制度時，應(yīng)該注意以下兩點(diǎn)：第一是薪酬的激勵性。所謂薪酬，是指企業(yè)向員工提供的報酬，用以吸引、保留和激勵員工，具體包括：工資、獎金、福利、股票期權(quán)等[21]。從這一定義我們可以看出，薪酬對于員工主要有兩面因素：保健因素和激勵因素。保健因素是讓員工不會不滿意的因素，使員工不至于情緒低落；激勵因素是使員工滿意的因素，保持員工的工作積極性。因此，在設(shè)計薪酬體系時，應(yīng)將重點(diǎn)放于激勵因素的設(shè)置，調(diào)動員工的工作熱情。第二是薪酬的公平性。在企業(yè)員工判斷薪酬的公平性時，通常會從三方面出發(fā)考慮：一是與他人比較。這包含企業(yè)內(nèi)部的公平性和外部一致性，員工不僅會與企業(yè)內(nèi)部和自己處于相同職位的人相比，還會和和自己從事相同工種的企業(yè)外部人員相比；二是與制度比較。員工要求企業(yè)薪酬制度公開透明，觀察管理的是否合理，是否具有可行性；三是與自我比較。員工會將自己過去的付出和收入相比較以產(chǎn)生公平感。當(dāng)薪酬管理失去了公平性，薪酬就沒有了其應(yīng)有的意義。

4.幫助員工完善其職業(yè)生涯規(guī)劃

自我實現(xiàn)與員工的主觀幸福感具有相互促進(jìn)的作用，當(dāng)員工實現(xiàn)自身價值

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時，會產(chǎn)生幸福感體驗；而當(dāng)員工具有高幸福感體驗時，會激勵自我去追求實現(xiàn)自我價值的目標(biāo)。在工作中的成就感和自豪感對于員工主觀幸福感體驗的提升具有重要作用。據(jù)此，企業(yè)可以從自我實現(xiàn)的方面，提升員工的主觀幸福感。首先，企業(yè)可以通過對員工委以重任，提高其工作的成就感；其次，在授權(quán)方式上可以采取部分授權(quán)方式和完全授權(quán)方式，增強(qiáng)企業(yè)和員工之間的信任感、歸屬感和榮譽(yù)感，增加員工的積極情緒情感的體驗；最后，幫助員工完善其職業(yè)生涯規(guī)劃，為員工創(chuàng)造可能自我實現(xiàn)的條件，滿足其實現(xiàn)自我價值的需要，特別是針對優(yōu)秀員工，做投資性的培養(yǎng)，有助于留住人才。

5.建立輕松良好的工作家庭關(guān)系

我國是崇尚集體主義文化的國家，在集體主義文化的氛圍中，和諧良好的工作家庭關(guān)系顯得尤為重要。工作和家庭是相輔相成的。在工作中，良好的同事關(guān)系和上下級關(guān)系、輕松愉快的工作環(huán)境，都有助于提升員工的主觀幸福感；家庭生活中，和諧和睦的家庭氛圍，容易積累積極情緒，對在工作中的表現(xiàn)有著積極的影響。企業(yè)可以加強(qiáng)對于員工的個性化關(guān)心，增強(qiáng)員工的歸屬感，讓員工以企業(yè)為家，增強(qiáng)工作的自主性。

6.提高員工的組織和職業(yè)的認(rèn)同感

積極管理的管理理念強(qiáng)調(diào)增強(qiáng)員工的主觀幸福感的最終調(diào)節(jié)機(jī)制是組織和職業(yè)的認(rèn)同感。在工作領(lǐng)域中的個人的認(rèn)同感可以分為兩方面，即組織認(rèn)同感和職業(yè)認(rèn)同感。組織認(rèn)同感就是員工對于組織的感知，并將組織的成功與失敗是為自己的成功與失敗[22]。職業(yè)認(rèn)同感指的就是員工對于職業(yè)的感知，并在此基礎(chǔ)上產(chǎn)生的對于自己所從事職業(yè)的一種肯定的情感體驗。一般來講，在工作中擁有積極自我認(rèn)同感的員工更可能會體會到主觀幸福感，所以，加強(qiáng)員工的組織和職業(yè)的認(rèn)同感對于主觀幸福感會產(chǎn)生積極的影響。

（三）具體案例分析

理論服務(wù)于實踐，主觀幸福感作為一種積極的心態(tài)，提高員工的工作熱情和積極性，進(jìn)而提升企業(yè)美譽(yù)度，贏得忠實的顧客群，創(chuàng)造工作績效的最大化。下面以“海底撈”火鍋為實際案例探討主觀幸福感研究在企業(yè)管理中的作用。將主觀幸福感應(yīng)用于員工管理，考慮的主要是營造輕松的工作環(huán)境，培養(yǎng)員工的積極人格，從而讓員工在工作中產(chǎn)生幸福的情感體驗。通過為員工營造一種積極優(yōu)越的環(huán)境中，企業(yè)可以幫助員工培養(yǎng)并維持積極的人格，有些情況下，員工甚至?xí)晕壹ぐl(fā)并不斷維持積極人格，這樣最終能幫助員工形成積極的情感體驗，獲得主觀上的幸福感。相比較其他餐飲業(yè)一線員工而言，海底撈的員工有著非常優(yōu)越海底撈管理層規(guī)定：所有員工都必須住在配有空調(diào)的兩居室、三居室，不能是地下室，而且距離店鋪的路程步行不能超過20 分鐘，因為太遠(yuǎn)會縮短員工的休息時間。夫妻倆都在“海底撈”的，還必須考慮讓他們單獨(dú)住一個房間[23]。同時，海底撈致力于提高員工滿意度，采用關(guān)懷式管理，樹立員工與企業(yè)是一體的概念，采取人性化的管理。除了給員工提供優(yōu)越的環(huán)境以外，在海底撈的內(nèi)刊上，有這樣一句話：倡雙手改變命運(yùn)之理，樹公司公平公正之風(fēng)。它采取內(nèi)部晉升制，并積極鼓勵每一位員工，因此每一位員工都

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全心投入如何能更好的滿足顧客需求，為企業(yè)的發(fā)展獻(xiàn)計獻(xiàn)策[24]。同時公司給所有員工都買了保險，給了員工充分的安全和穩(wěn)定感。正是海底撈這種積極的工作環(huán)境，一位進(jìn)公司才一個多月的員工，有一次接受記者采訪時，臉上的笑容很由衷，“平時沒什么好擔(dān)心的，只要好好干就行了。[25]”

海底撈本著以人為本的管理理念，極力推行一種信任平等的價值觀。從為員工提供優(yōu)越的生活條件到為員工購買保險等等，海底撈這個大環(huán)境中處處彌漫著“平等”、“信任”的氣息，因此孕育和培養(yǎng)了員工積極的人格，顧客從海底撈員工臉上讀到的都是發(fā)自內(nèi)心的笑容。在優(yōu)越、信任、平等的大氛圍下，海底撈的員工積極的工作，同時發(fā)掘著自身的潛能，為公司建言獻(xiàn)策，健康快樂地生活和工作。當(dāng)別的餐飲店員工因為打破一個杯子而痛苦的面臨罰款時，海底撈的員工擁有為客人免單和送菜的權(quán)力；當(dāng)別的餐飲店員工在工作時間不得私自離開工作崗位時，海底撈的員工有權(quán)力去超市買冰激凌送給顧客；當(dāng)有些企業(yè)員工在軍事化的高強(qiáng)度管理下壓力重重甚至輕生時，海底撈的員工正快樂幸福地為下一個目標(biāo)而奮斗，對他們而言，工作帶給他們積極的情感體驗，工作是一個自我展示的機(jī)會，工作帶來的是快樂和希望，他們從中感受到的是十足的幸福感。

通過積極心理學(xué)在海底撈員工管理中的應(yīng)用分析，海底撈本著“人”這個關(guān)鍵詞出海底撈的員工在積極環(huán)境和積極人格的共同作用下，感受到了積極的情感體驗，從而認(rèn)可公司，快樂工作，用自然的微笑、發(fā)自內(nèi)心的微笑，將顧客當(dāng)做親友般照料，為顧客提供了無與倫比的特色服務(wù)，從而譜寫了海底撈的神話。

五 研究的不足與展望

本文以前人理論為基礎(chǔ)，與管理思想相結(jié)合，從理論角度切入到企業(yè)管理的實踐中，未能從實證出發(fā)，對相關(guān)具體對象調(diào)查研究，沒有對幸福感研究在企業(yè)管理中的應(yīng)用進(jìn)行深入探討，使得本文缺乏一定的說服力。本文討論的主要是幸福感的主要研究方面，即主觀幸福感，對于心理幸福感沒有涉及，有待于今后研究的進(jìn)一步展開。

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齊齊哈爾大學(xué)畢業(yè)設(shè)計（論文）

致謝

論文如期完成，特此感謝我最尊敬最親愛的的導(dǎo)師侯女士。在這四年里，學(xué)習(xí)上是我指點(diǎn)迷津的良師，生活中是無私關(guān)懷的益友，謝謝您這四年的教誨，我會銘記于心。感謝教育與傳媒學(xué)院的老師和同學(xué)們，你們讓我在他鄉(xiāng)依然感到溫暖。我還要真誠的謝謝我的父母，是你們的愛讓我一路前行。

第三篇：激光共聚焦顯微鏡在細(xì)胞骨架研究中的應(yīng)用

激光共聚焦顯微鏡在細(xì)胞骨架研究中的應(yīng)用

摘要

隨著生物技術(shù)研究的不斷發(fā)展，對觀察細(xì)胞形態(tài)所使用的儀器要求也越來越高，普通光學(xué)顯微鏡已經(jīng)無法滿足研究的需要，激光共聚焦顯微鏡的產(chǎn)生從一定程度上彌補(bǔ)了光學(xué)顯微鏡的不足。激光共聚焦顯微鏡具有分辨率高、靈敏度高、放大率高等優(yōu)點(diǎn)，使得它在形態(tài)學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)等領(lǐng)域研究中成為有力工具。本文就其在細(xì)胞骨架的研究方面做一簡要綜述。關(guān)鍵詞

激光共聚焦顯微鏡

細(xì)胞骨架

Laser Scanning Confocal Microscope in the study of cell skeleton

Abstract With the development of biotechnology research, instrumentation requirements for cell morphology was observed being used increasingly high, ordinary optical microscope has been unable to meet the needs of the study, the generation of laser scanning confocal microscope optical microscope to make up to some extent from the inadequate.Laser scanning confocal microscope with high resolution, high sensitivity, magnification advantages, making it a powerful tool in the research field morphology, molecular cell biology, neuroscience, pharmacology, genetics, etc..In this paper, a brief overview of their research in the cytoskeleton.Keywords confocal microscopy cytoskeleton

所謂激光共聚焦顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscope，簡稱LSCM)與傳統(tǒng)顯微鏡相比，它具有分辨率高、靈敏度高、放大率高等優(yōu)點(diǎn)，可以在細(xì)胞水平上進(jìn)行多種功能的測量和分析，得到具有三維清晰度的原色圖像，而且它還可以處理活的標(biāo)本，不會對標(biāo)本造成物理化學(xué)特性的破壞。隨著軟件開發(fā)和應(yīng)用技術(shù)的不斷完善，激光掃描共聚焦顯微鏡已成為形態(tài)學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代強(qiáng)有力的研究工具[1-2]。

正是由于激光共聚焦顯微鏡在細(xì)胞學(xué)中有很大的應(yīng)用范圍，本文就其在細(xì)胞骨架方面的研究做一簡要綜述。

1.LSCM的原理

1.1普通光學(xué)顯微鏡的原理

普通光學(xué)顯微鏡的成像系統(tǒng)由產(chǎn)生物像的光學(xué)系統(tǒng)(目鏡和物鏡)、照明系統(tǒng)和機(jī)械支架三部分組成。其中目鏡和物鏡都是具有放大成像功能的凸透鏡。顯微鏡的放大倍數(shù)與每個凸透鏡的放大倍數(shù)密切相關(guān)。

當(dāng)物體與物鏡的距離小于焦距時，在物體的同一側(cè)形成的是正立放大的虛像。當(dāng)物體與物鏡的距離在1—2倍焦距之間時，在物鏡的另一側(cè)形成倒立縮小的實像。所觀察的物體位于物鏡的焦點(diǎn)的前方(1— 2倍焦距之間)，在物鏡的另一側(cè)形成一放大、倒立的實像于目鏡焦點(diǎn)以內(nèi)(即在目鏡的單倍焦距內(nèi))，此物像通過目鏡的再次放大，得到虛像。此物像比眼睛直接看到的物體AB要大得多，所以使用顯微鏡可以看清非常微小的物體[3]。

不過顯微鏡的分辨率受到一些物理因素的影響，主要有球差和色差兩個方面。所謂球差，是由于透鏡不能把近軸光線和遠(yuǎn)軸光線在光軸上共聚焦。以至透過標(biāo)本一點(diǎn)的光線通過透鏡后，不能聚焦成一點(diǎn)，而是形成一個光斑，從而使成像模糊不清。所謂色差，是由于顯微鏡對不同顏色的光線具有不同的折射率造成的。因為不同顏色的光具有不同的波長，透鏡類似于三棱鏡，對不同顏色的光線具有不同的折射率。所以光線透過透鏡后。不同顏色的光聚焦在不同點(diǎn)上，從而使成像模糊，而且像的邊緣尚帶有色彩。1.2 LSCM基于光學(xué)顯微鏡的改進(jìn)[4] 1.2.1用激光做光源

因為激光的單色性非常好，光源波束的波長相同，從根本上消除了色差。1.2.2采用共聚焦技術(shù)

在物鏡的焦平面上放置了一個當(dāng)中帶有小孔的擋板，將焦平面以外的雜散光擋住，消除了球差；并進(jìn)一步消除了色差。1.2.3采用點(diǎn)掃描技術(shù)

將樣品分解成二維或三維空間上的無數(shù)點(diǎn)，用十分細(xì)小的激光束(點(diǎn)光源)逐點(diǎn)逐行掃描成像，再通過微機(jī)組合成一個整體平面的或立體的像。而傳統(tǒng)的光鏡是在場光源下一次成像的，標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會受到相鄰點(diǎn)的衍射光和散射光的干擾。這兩種圖像的清晰度和精密度是無法相比的。

1.2.4用計算機(jī)采集和處理光信號，并利用在共聚焦顯微鏡中，計算機(jī)代替了人眼或照相機(jī)進(jìn)行觀察、攝像，得到的圖像是數(shù)字化的，可以在電腦中進(jìn)行處理，再一次提高圖像的清晰度。而且利用了光電倍增管，可以將很微弱的信號放大，靈敏度大大提高。1.3 LSCM 的原理[5-7]

LSCM是在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激光熒光探針產(chǎn)生信號，并利用計算機(jī)進(jìn)行圖像處理，獲得高分辨率、高質(zhì)量的圖像的顯微鏡。LSCM主要由激光光源、掃描器（內(nèi)裝有針孔光欄、分光鏡、發(fā)射熒光濾光片及檢測器）、熒光顯微鏡（裝有微量步進(jìn)電動機(jī)）系統(tǒng)、光學(xué)裝置、計算機(jī)存儲與處理及控制系統(tǒng)等部分組成。通過針孔成像作用，還可以對樣品進(jìn)行直接無損傷的光學(xué)斷層掃描，進(jìn)而實現(xiàn)立體結(jié)構(gòu)的三維重建以及空間結(jié)構(gòu)和熒光強(qiáng)度信息。

傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場光源，標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會受到鄰近點(diǎn)的衍射光或散射光的干擾；激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對標(biāo)本內(nèi)焦平面上的每一點(diǎn)掃描，標(biāo)本上的被照射點(diǎn)發(fā)射的熒光在探測針孔處成像，而來自該點(diǎn)以外的任何發(fā)射熒光均被探測針孔阻擋，由探測針孔后的光電倍增管逐點(diǎn)接受，在計算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。所以照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的，也就是說照明針孔與探測針孔具有共同的焦平面。在載物臺上加一個微量步進(jìn)馬達(dá)，使載物臺沿垂直方向(Z軸)上下步進(jìn)移動，將樣品新的一個層面移到焦平面上，這個層面又成像在顯示器上，隨著z軸的不斷移動，就可得到樣品不同層面連續(xù)的光學(xué)圖像，實現(xiàn)“光學(xué)切片”的目的，被形象地稱為顯微“CT”，在此基礎(chǔ)上計算機(jī)系統(tǒng)自動進(jìn)行三維重建。

與此同時LSCM也是活細(xì)胞的動態(tài)觀察、多重免疫熒光標(biāo)記和離子熒光標(biāo)記觀察的有力工具。

2.激光共聚焦顯微鏡在細(xì)胞骨架研究中的應(yīng)用

2.1激光共聚焦顯微鏡在活細(xì)胞的細(xì)胞骨架研究中的應(yīng)用

微絲（microfilaments，MF），又稱肌動蛋白纖維（actin filament），是真核細(xì)胞中由肌動蛋白（actin）組成，直徑7nm的骨架纖維。參與細(xì)胞內(nèi)的多種生理活動，如胞質(zhì)流動，肌肉收縮，細(xì)胞分裂，細(xì)胞顆粒的運(yùn)輸?shù)?，維持細(xì)胞的形狀，參與細(xì)胞頂端生長，細(xì)胞壁構(gòu)建，細(xì)胞器定位等[8]。

微絲骨架通常是通過迅速的聚合解聚來調(diào)整和改變其形態(tài)，從而在細(xì)胞執(zhí)行各種功能及應(yīng)對外界刺激時維持細(xì)胞正常的生理活動。細(xì)胞中的微絲骨架的動態(tài)變化直接受肌動蛋白結(jié)合蛋白（actin-binding proteins, ABPs）的調(diào)節(jié)。ABPs 通過與單體肌動蛋白（G-actin）或絲狀肌動 蛋白（F-actin）結(jié)合，調(diào)節(jié)二者之間的動態(tài)平衡，進(jìn)而調(diào)控微絲骨架的組織和功能。ABPs 的活性又受諸多其他因素的調(diào)控，諸如 Ca2+、pH、磷酸化等等，因此微絲骨架能通過 ABPs 對細(xì)胞內(nèi)外信號作出的反應(yīng)，從而參與細(xì)胞內(nèi)的各種生理活動[9]。

細(xì)胞內(nèi)微絲骨架是高度動態(tài)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，采用合適的標(biāo)記探針對體內(nèi)的微絲骨架進(jìn)行標(biāo)記、獲得可視化效果強(qiáng)的圖像，是研究體內(nèi)微絲骨架形態(tài)結(jié)構(gòu)及動態(tài)變化的重要前提。隨著發(fā)光蛋白的發(fā)現(xiàn)，植物體內(nèi)微絲骨架的標(biāo)記方法也從利用微絲的特異性藥物向著構(gòu)建發(fā)光蛋白與某種可以特異結(jié)合微絲的蛋白或肽段構(gòu)成的融合蛋白方向發(fā)展。Kost等人最先使用 GFP 與小鼠 talin 蛋白 C 端的肌動蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域構(gòu)成融合蛋白（GFP-mTn）在植物體內(nèi)標(biāo)記微絲[10]。隨后，Timmers 將GFP與一種微絲結(jié)合蛋白——擬南芥絲束蛋白1（AtFIM1）構(gòu)成融合蛋白（GFP-AtFIM1）用于標(biāo)記微絲[11]。

也正是由于這些發(fā)光探針的使用，結(jié)合激光共聚焦顯微鏡的使用，才使得對于細(xì)胞骨架系統(tǒng)的研究越來越透徹，一步步揭示出細(xì)胞骨架的奧秘。2.2激光共聚焦顯微鏡在凋亡細(xì)胞研究中的應(yīng)用

近年的越來越多的研究顯示，微管在細(xì)胞凋亡過程中也起著非常重要的作用[12-13]。細(xì)胞凋亡(apoptosis)是不同于細(xì)胞壞死的一種細(xì)胞主動死亡方式，并由特定的基因控制。凋亡細(xì)胞在形態(tài)上出現(xiàn)變圓皺縮、染色質(zhì)濃縮邊集、核碎裂、凋亡小體形成等變化，并最終由非炎癥過程清除。由于細(xì)胞凋亡獨(dú)特地影響著機(jī)體的細(xì)胞發(fā)育和代謝。在監(jiān)測和清除腫瘤細(xì)胞與突變細(xì)胞等方面也可能發(fā)揮重要的作用。在細(xì)胞凋亡的研究中，LSCM以其獨(dú)特的優(yōu)勢已被廣泛地應(yīng)用于監(jiān)測重要生理改變的方面。

新型檢測細(xì)胞凋亡主要有以下幾種方法：電鏡觀察、熒光及普通光學(xué)顯微鏡觀察、DNA凝膠電泳、流式細(xì)胞術(shù)、原位缺口末端標(biāo)記(in situ nick—end labeling，TUNEL)DNA斷片化分析以及凋亡過程蛋白因子、酶活性檢測等。

目前認(rèn)為凋亡細(xì)胞特異性的形態(tài)學(xué)改變?nèi)允桥袛嗉?xì)胞凋亡的最直觀可靠的指標(biāo)。過去對細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)研究方法局限于活性細(xì)胞和組織切片染色、熒光鏡觀察．或者石蠟切片原位末端標(biāo)記法。由于普通光鏡的分辨率和清晰度有限，且更多局限于對切片的觀察，而電鏡又顯然不適合對凋亡這一復(fù)雜動態(tài)過程的監(jiān)測．激光掃描共聚焦顯微鏡可對活細(xì)胞清晰成像的特點(diǎn)。使其在對細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察分析中倍受重視。

觀察發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞微管的形態(tài)隨細(xì)胞凋亡的發(fā)展發(fā)生相應(yīng)的改變，凋亡早期微管的分布發(fā)生改變，逐漸凝聚成無功能的團(tuán)塊狀，因此也伴隨細(xì)胞骨架的功能改變，細(xì)胞逐漸失去其原來的細(xì)胞形態(tài)，到凋亡晚期，微管結(jié)構(gòu)降解，細(xì)胞骨架塌陷，在共聚焦顯微鏡下，細(xì)胞熒光著色變淺，分布減少，細(xì)胞更加扁平，因此，細(xì)胞凋亡的發(fā)生、發(fā)展，與細(xì)胞骨架有著極其密切的關(guān)系，共聚焦顯微鏡在此之中發(fā)揮著不可替代的作用[14]。3.小結(jié)

通過多篇文獻(xiàn)的反映，激光共聚焦顯微鏡呈現(xiàn)出一系列的優(yōu)點(diǎn)，比如：有利于多熒光探針標(biāo)記樣品高清晰度、高分辨率圖像的采集，無損傷連續(xù)光學(xué)切片圖像的采集一顯微“CT”，三維圖像重建，可以對感興趣區(qū)域的掃描，定位、定量測定等等。這些優(yōu)點(diǎn)的應(yīng)用不僅僅可以使激光共聚焦顯微鏡在細(xì)胞骨架方面有所研究，還會對其他一些方面有所幫助，通過激光共聚焦顯微鏡得到的豐富的實驗數(shù)據(jù)，有利于支持我們的實驗研究。同時，充分運(yùn)用 LSCM 所攜帶軟件的定量分析功能對所獲得的圖像進(jìn)一步分析統(tǒng)計，也會為我們的實驗結(jié)果增添可信之處。對已獲得的實驗相關(guān)圖像進(jìn)行量化和統(tǒng)計分析得到更加直觀的信息，這在科學(xué)研究中也越來越重要，而LSCM軟件的強(qiáng)大功能就能使這些復(fù)雜的數(shù)據(jù)統(tǒng)計變的簡單而易懂。所以，在實驗過程中我們還要充分利用LSCM所攜帶軟件的各種功能為的研究工作提供更多信息。但是激光共聚焦顯微鏡也有一些不得不說的缺點(diǎn)，如價格昂貴，對操作人員技術(shù)要求高等，這也限制了它在一些領(lǐng)域中的應(yīng)用[15]。

總而言之，我們相信，LSCM應(yīng)用于科學(xué)研究之后為生命科學(xué)所開拓的實時觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和特定分子、離子動態(tài)生物學(xué)變化的途徑，隨著新軟件的不斷開發(fā)及各個學(xué)科的不斷發(fā)展和相互滲透，必將有更廣闊的發(fā)展前景。

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第四篇：淺談生物信息學(xué)在生物學(xué)研究中的應(yīng)用

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淺談生物信息學(xué)在生物學(xué)研究中的應(yīng)用

生物信息學(xué)（Bioinformatics）是一門新興的、正在迅速發(fā)展的交叉學(xué)科，目前國內(nèi)外對生物信息學(xué)的定義眾說紛紜，沒有形成統(tǒng)一認(rèn)識。概括來說，現(xiàn)代生物信息學(xué)是以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子數(shù)據(jù)庫及其相關(guān)的圖書、文獻(xiàn)、資料為主要對象，以數(shù)學(xué)、信息學(xué)、計算機(jī)科學(xué)為主要手段，對浩如煙海的原始數(shù)據(jù)和原始資料進(jìn)行存儲、管理、注釋、加工，使之成為具有明確生物意義的生物信息。并通過對生物信息的查詢、搜索、比較、分析，從中獲得基因的編碼、凋控、遺傳、突變等知識；研究核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)、功能及其相互關(guān)系；研究它們在生物體內(nèi)的物質(zhì)代謝、能量轉(zhuǎn)移、信息傳導(dǎo)等生命活動中的作用機(jī)制。

生物信息在生物學(xué)研究上的應(yīng)用主要包括在基因組學(xué)研究上的應(yīng)用和在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的應(yīng)用。

1.在基因組學(xué)研究中的應(yīng)用

基因組（genome）表示一個生物體所有的遺傳信息的總和。一個生物體基因所包含的信息決定了該生物體的生長、發(fā)育、繁殖和消亡等所有生命現(xiàn)象。有關(guān)基因組的研究稱為基因組學(xué)(Genomics)，基因組學(xué)根據(jù)研究重點(diǎn)的不同分為序列基因組學(xué)(Sequence genomics)、結(jié)構(gòu)基因組學(xué)(Structural genomics)、功能基因組學(xué)(Functional genomics)與比較基因組學(xué)(Comparative genomics)。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)的研究：結(jié)構(gòu)基因組學(xué)(Structural genomics)是基于基因組學(xué)的一個重要組成部分和研究領(lǐng)域，它是一門通過基因作圖、核苷酸序列分析確定基因組成、基因定位的科學(xué)口。生物信息學(xué)在結(jié)構(gòu)基因組學(xué)中的應(yīng)用主要在于：基因組作圖、核苷酸序列信息分析、基因定位、新基因的發(fā)現(xiàn)和鑒定等方面。比較基因組學(xué)的研究：借助生物信息學(xué)的手段對不同生物基因組的比較、分析，可以進(jìn)行生物進(jìn)化等方面的研究。

功能基因組學(xué)的研究：功能基因組學(xué)(Functional genomics)是指在全基因組序列測定的基礎(chǔ)上，從整體水平研究基因及其產(chǎn)物在不同時空、條件下的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系及活動規(guī)律的學(xué)科。功能基因組的研究是后基因組時代的關(guān)鍵點(diǎn)，它將借助生物信息學(xué)的技術(shù)平臺，利用先進(jìn)的基因表達(dá)技術(shù)及龐大的生物功能檢測體系，從浩瀚無垠的基因庫篩選并確知某一特定基因的功能，并通過比較分析基因及其表達(dá)的狀態(tài)，確定出基因的功能內(nèi)涵，揭示生命奧秘，甚至開發(fā)出基因產(chǎn)品。

2.在蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中的應(yīng)用

在20世紀(jì)中后期，隨著DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的提出和蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的解析，生生命科學(xué)的研究進(jìn)入了分子生物學(xué)時代，而遺傳信息載體DNA和生命功能的體現(xiàn)者蛋白質(zhì)的研究，成為了其主要內(nèi)容。90年代初期啟動的龐大的人類基因組計劃，已經(jīng)取得巨大的成在20世紀(jì)中后期，隨著DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的提出和蛋白質(zhì)

空間結(jié)構(gòu)的解析，生生命科學(xué)的研就，人類基因組序列草圖繪制完成后，生命科學(xué)研究跨入了后基因組時代。然而，人們清醒地識到基因僅是遺傳信息的載體，而生命活動的執(zhí)行者是基因的表達(dá)產(chǎn)物—蛋白質(zhì)，它是生命現(xiàn)象復(fù)雜性和多變性的直接體現(xiàn)者。

蛋白質(zhì)組一詞是澳大利亞學(xué)者馬克威爾金斯在1994年最先提出來的，它是指基因組表達(dá)的所有相應(yīng)的蛋白質(zhì)，也可以說是指細(xì)胞或組織或機(jī)體全部蛋白質(zhì)的存在及其活動方式。蛋白質(zhì)組學(xué)是從整體的蛋白質(zhì)水平上,在一個更加深入、更加貼近生命本質(zhì)的層次上去探討和發(fā)現(xiàn)生命活動的規(guī)律和重要生理、病理現(xiàn)象的本質(zhì)等。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究對揭示生命活動規(guī)律，探討重大疾病機(jī)制，疾病診斷和防治、新藥的開發(fā)提供重要的理論基礎(chǔ)。

生物信息學(xué)在蛋白質(zhì)組學(xué)中的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫的應(yīng)用

2.1蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫

蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的主要內(nèi)容之一。通過構(gòu)建不同環(huán)境條件下組織或細(xì)胞全部蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)庫來研究蛋白質(zhì)表達(dá)的差異情況。與其他數(shù)據(jù)庫相比, 目前大部分蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫都有以下幾個方面的特點(diǎn):（1）由于蛋白質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù)的種類繁多,蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫的種類也多種多樣,如雙向電泳數(shù)據(jù)庫、基于蛋白序列的數(shù)據(jù)庫、蛋白質(zhì)一級或高級結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫、蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)庫等等;（2）新速度快,網(wǎng)絡(luò)上的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫的數(shù)據(jù)幾乎每天都在更新;（3）網(wǎng)共享程度高, 越來越多的數(shù)據(jù)庫資源與互聯(lián)網(wǎng)相互配合,使得蛋白質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù)的利用率空前的提高。蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫的主要內(nèi)容即集中在基于雙向電泳結(jié)果的數(shù)據(jù)庫和基于蛋白質(zhì)序列信息的數(shù)據(jù)庫。

2.1.1基于雙向電泳圖譜的數(shù)據(jù)庫

雙向電泳技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究中最重要的實驗技術(shù)之一，所以基于雙向電泳圖片的數(shù)據(jù)庫也成了蛋白質(zhì)組學(xué)研究中主要內(nèi)容。

2.1.2 基于蛋白質(zhì)序列信息的數(shù)據(jù)庫

基于蛋白質(zhì)序列信息的數(shù)據(jù)庫是生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫中最基本的數(shù)據(jù)庫，這些數(shù)據(jù)庫以氨基酸殘基順序為基本內(nèi)容，并附有注釋信息（計算機(jī)的序列分析結(jié)果和生物學(xué)家查閱文獻(xiàn)的結(jié)果）?；诘鞍踪|(zhì)序列的數(shù)據(jù)庫很多，主要有蛋白質(zhì)信息資源數(shù)據(jù)庫（PIR）、SWISS3D和 TrEMBL等等。

2.1.3 其他蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫

蛋白質(zhì)生物信息學(xué)包含很多方面的內(nèi)容：如蛋白質(zhì)大分子的結(jié)構(gòu)、相互作用等等，所以，除了上述的一些數(shù)據(jù)庫之外，還有很多關(guān)于構(gòu)象、相互作用等方面的數(shù)據(jù)庫，是基于質(zhì)譜應(yīng)用的數(shù)據(jù)庫，屬于混合數(shù)據(jù)庫。將生物信息學(xué)的實驗思路引入蛋白質(zhì)組學(xué)的實驗方案后，實驗人員可以通過互聯(lián)網(wǎng)上的信息設(shè)計實驗方

案，避免了很多重復(fù)性的勞動，少走很多彎路，為蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展提供了可靠的信息資源。值得一提的是，上文提到的大多數(shù)數(shù)據(jù)庫都能實現(xiàn)數(shù)據(jù)接收、在線查詢和空間結(jié)構(gòu)的可是化瀏覽等多種功能。而且，幾乎所有這些數(shù)據(jù)庫都是免費(fèi)的，都可以免費(fèi)下載或提供免費(fèi)服務(wù)，使得蛋白質(zhì)組學(xué)可以在生物信息學(xué)的輔助之下快速發(fā)展。

2.2生物信息學(xué)與蛋白質(zhì)分析

在蛋白質(zhì)組分析過程中，生物信息學(xué)的作用不僅僅體現(xiàn)在數(shù)據(jù)庫的查閱和資料的整合中，生物信息學(xué)軟件在蛋白質(zhì)組研究領(lǐng)域的作用根式至關(guān)重要的。蛋白質(zhì)分析軟件應(yīng)用主要集中在結(jié)合蛋白質(zhì)組研究中的分離技術(shù)和堅定技術(shù)識別蛋白質(zhì)（如2-DE）圖像分析、Edman降解的序列組合、質(zhì)譜數(shù)據(jù)的綜合分析等），對有價值的未知蛋白質(zhì)進(jìn)行分析和預(yù)測（包括序列分析、結(jié)構(gòu)預(yù)測、結(jié)構(gòu)域、電點(diǎn)等性質(zhì)的檢測等）、針對蛋白質(zhì)的分析預(yù)測方法應(yīng)用的工具有4個方面。

2.2.1 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)分析

根據(jù)20中氨基酸的理化性質(zhì)可以分析電泳等實驗中的未知蛋白質(zhì)，同樣也可以分析已知蛋白質(zhì)的物化性質(zhì)。設(shè)計PROPSEARCH的目的是為了通過排比方法查詢一個新的蛋白質(zhì)序列失敗時,查找公認(rèn)的蛋白質(zhì)家族而設(shè)計的。PROPSEARCH可以通過氨基酸組分來查詢,同時也可以通過其他的特性來進(jìn)行查詢,如從序列中計算所得的分子量、挑選的二肽組分的含量等。

2.2.2 蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)預(yù)測

從蛋白質(zhì)序列出發(fā)，預(yù)測蛋白質(zhì)的許多物理性質(zhì)，包括等電點(diǎn)、分子量、酶切特性、疏水性、電荷分布等。

2.2.3蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)預(yù)測

二級結(jié)構(gòu)是指α螺旋和β折疊等規(guī)則的蛋白質(zhì)局部結(jié)構(gòu)元件。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測的基本依據(jù)是每一段相鄰的氨基酸殘基具有形成一定二級結(jié)構(gòu)的傾向。因此,進(jìn)行二級結(jié)構(gòu)預(yù)測需要通過統(tǒng)計和分析發(fā)現(xiàn)這些傾向或者規(guī)律。蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)預(yù)測的方法有3種。一是由已知結(jié)構(gòu)統(tǒng)計各種氨基酸殘基形成二級結(jié)構(gòu) 的構(gòu)象趨勢,其中最常用的是Chou和Fasman 法;二是基于氨基酸的物理化學(xué)性質(zhì),包括堆積性、疏水性、電荷性、氫鍵形成能力等;三是通過序列比對,由已知三維結(jié)構(gòu)的同源蛋白推斷未知蛋白的二級結(jié)構(gòu)。各種方法預(yù)測的準(zhǔn)確率隨蛋白質(zhì)類型的不同而變化。一般對于α螺旋預(yù)測精度較好,對β折疊差些,而對除α螺旋和β折疊等之外的無規(guī)則二級結(jié)構(gòu)則效果很差。

2.2.4蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)

蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)是預(yù)測時最復(fù)雜和最困難的預(yù)測技術(shù)。序列差異較大的蛋白質(zhì)序列也可能折疊成類似的三維構(gòu)象。由于蛋白質(zhì)的折疊過程并不十分清晰,從理論上解決蛋白質(zhì)折疊的問題還有待進(jìn)一步的科學(xué)發(fā)展,但也有了一些有一定作

用的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測方法。即與已知結(jié)構(gòu)的序列比較,同源模建,threading算法和 折疊識別方法。常見的預(yù)測算法有:SWISS-MODEL(自動蛋白質(zhì)同源模建服務(wù)器)、CPHmodels等。

2.3 生物信息學(xué)與蛋白質(zhì)功能

生物信息學(xué)發(fā)展到今天不僅可以對蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和預(yù)測，而且可以對已知或者未知的基因產(chǎn)物進(jìn)行功能上全面的分析和預(yù)測。

生物信息學(xué)最常用的分析方法是模式識別。主要是利用存在于蛋白質(zhì)序列結(jié)構(gòu)中的某些特殊的特征模體來識別相關(guān)蛋白質(zhì)性質(zhì)。換而言之，就是從新的蛋白序列中發(fā)現(xiàn)標(biāo)志性的序列或者結(jié)構(gòu)，以此建立模式，然后在已經(jīng)建立好的已知蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫中，搜集于此相似的模式，來確定未知蛋白質(zhì)的歸屬，從而預(yù)測它的功能。許多基因是在特定時期和條件下被激活，才能表達(dá)出來，在正常人工模擬的環(huán)境下根本無法表達(dá)。類似于這樣的恩未知蛋白質(zhì)也需要通過生物信息學(xué)的方法計算分析預(yù)測，以獲得它的功能信息。

生物信息學(xué)的發(fā)展將給生命科學(xué)研究帶來革命性的變革，將幫助人類認(rèn)識生命的起源、進(jìn)化、遺傳和發(fā)育的本質(zhì)，揭示人體生理和病理過程的分子基礎(chǔ)，為人類疾病的預(yù)測、診斷、預(yù)防和治療提供合理和有效的方法或途徑，同時還將對醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品、農(nóng)業(yè)等產(chǎn)業(yè)產(chǎn)生巨大的推動作用，甚至可能引發(fā)新的產(chǎn)業(yè)革命。21世紀(jì)是生命科學(xué)的時代，生物信息學(xué)為生命科學(xué)的發(fā)展提供了便利和強(qiáng)有利的技術(shù)支持，推動著生命科學(xué)的迅速發(fā)展。

第五篇：流式細(xì)胞儀在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用

摘 要：隨著現(xiàn)代激光技術(shù)、電子檢測技術(shù)和電子計算機(jī)技術(shù)等的迅速發(fā)展，流式細(xì)胞儀(FCM)在免疫學(xué)、生物學(xué)、遺傳學(xué)、血液學(xué)、臨床檢驗等領(lǐng)域中得到了更加廣泛的應(yīng)用。在免疫學(xué)研究領(lǐng)域，F(xiàn)CM以快速、靈活及定量等特點(diǎn)被廣泛地應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床治療的各個方面，尤其是與單克隆抗體技術(shù)的結(jié)合，使其在免疫分型、分選、免疫監(jiān)測、免疫細(xì)胞的系統(tǒng)發(fā)生及特性研究等方面發(fā)揮了重要的作用，成為現(xiàn)代免疫學(xué)研究不可缺少的工具。該文對近年來流式細(xì)胞儀在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞儀；免疫學(xué)；檢測

流式細(xì)胞儀(flow cytometry，F(xiàn)CM)是一種集激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測量技術(shù)、計算機(jī)技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)以及單克隆抗體技術(shù)為一體的新型高科技儀器[1]。FCM 可對細(xì)胞大小、細(xì)胞表面抗原的表達(dá)等進(jìn)行快速、靈活、定量、多參數(shù)的檢測，而且，可同時用于檢測細(xì)胞內(nèi)的核酸定量、DNA倍體、細(xì)胞周期分析，細(xì)胞因子和黏附分子等[2]。具有分析速度快、精確度高、重復(fù)性好和費(fèi)用低廉等優(yōu)點(diǎn)。流式細(xì)胞儀介紹

1.1 流式細(xì)胞儀的工作原理

流式細(xì)胞儀主要由流動室和液流系統(tǒng)，激光源和光學(xué)系統(tǒng)，光電管和檢測系統(tǒng)，計算機(jī)分析系統(tǒng)和細(xì)胞分選系統(tǒng)5部分組成，其中，流動室是儀器的核心部件。

將待測標(biāo)本制備成單細(xì)胞懸液，經(jīng)特異性熒光染料染色后，由氣壓裝置送入流動室，以一定的流速經(jīng)過噴嘴進(jìn)入激光聚焦區(qū)，流速的選擇與檢測的目的有關(guān)，此時，在激光束的照射下，被熒光染色的細(xì)胞產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光，其散射光信號和熒光信號經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)收集，由檢測系統(tǒng)轉(zhuǎn)換成為電信號，再通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器，轉(zhuǎn)換為可被計算機(jī)識別的數(shù)字信號，各種信號經(jīng)計算機(jī)采集后，用相應(yīng)的應(yīng)用軟件進(jìn)行分析處理，最后，以直方圖或三維圖的形式顯示出來。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料，可同時測定一個細(xì)胞上的多種不同的特征參數(shù)，從而可以對細(xì)胞進(jìn)行分類[3]。1.2 流式細(xì)胞儀機(jī)型介紹

近年，流式細(xì)胞儀的主要生產(chǎn)廠家有美國的BD(BectonDickinson)公司、貝克曼庫耳(Beckman Coulter)公司和德國的Partec公司。國內(nèi)使用的流式細(xì)胞儀主要由前兩家生產(chǎn)。它們生產(chǎn)出一系列科研型和臨床型的流式細(xì)胞儀，并研制生產(chǎn)了流式細(xì)胞儀所用的各種單克隆抗體和熒光試劑。

流式細(xì)胞儀可分為兩大類，一類為臨床分析型(又稱小型機(jī)、臺式機(jī))，其特點(diǎn)為儀器光路調(diào)節(jié)系統(tǒng)固定，自動化程度高，易學(xué)易掌握，適合在臨床實驗室中應(yīng)用。如BD公司的FACSCalibur，BeckmanCoulter公司的EPICSXL，Partec公司的Pas，Cytomation公司的MOFLO，Aber公司的Microcyte，Ortho公司Cytoron等。

另一類為科研分選型(又稱綜合型)，特點(diǎn)為功能齊全，分析靈活，可快速將所感興趣的細(xì)胞分選出來，同時可選配多種波長類型的激光器，適用于廣泛的科學(xué)研究之用。如BD公司的FACSVantage，Beckman Coulter公司的EPICS ALTRA，Partec公司的PasIII及Cytomation公司的MOFLOMLS等。

隨著計算機(jī)技術(shù)、電子制造技術(shù)、激光技術(shù)及熒光素合成技術(shù)的發(fā)展，流式細(xì)胞儀的制造工藝、功能、精確度等有了質(zhì)的飛躍。流式細(xì)胞儀已開始向模塊化發(fā)展，即它的光學(xué)系統(tǒng)、檢測器單元和電子系統(tǒng)都可以按照試驗要求隨意更換[4]。各流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠商繼續(xù)推出新產(chǎn)品以滿足用戶的不同需要。如BD公司的FACSAria(高速細(xì)胞分選儀)、分選增強(qiáng)型FACSVantage SETM(多色分析和高速分選流式細(xì)胞儀)、LSR II(數(shù)字化分析型流式細(xì)胞儀)，F(xiàn)ACSCanto(雙激光六色分析流式細(xì)胞儀)。BeckmanCoulter公司近年又推出了Cytomics ?FC 500系列，如FC 500MCL/MPL 采用單激光或雙激光激發(fā)方式，可進(jìn)行五色分析。Partec公司的頂級科研型十三色熒光流式細(xì)胞儀CYFLOW ML，臨床科研型六色熒光流式細(xì)胞儀DYFLOW SL。Amnis公司的Image Stream100(激光流動成像細(xì)胞儀)，將流式多色檢測技術(shù)和熒光顯微圖像顯示技術(shù)結(jié)合在一個平臺上，不僅可以通過熒光信號的強(qiáng)度，還可以通過細(xì)胞熒光圖像對細(xì)胞內(nèi)外信號定位，從而對細(xì)胞亞群進(jìn)行定性和定量分析。流式細(xì)胞儀在免疫學(xué)中的應(yīng)用近年來，隨著生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展和免疫學(xué)研究的深入，流式細(xì)胞儀在分子免疫學(xué)、免疫生物學(xué)和免疫遺傳學(xué)，免疫血液學(xué)、免疫藥理學(xué)、移植免疫學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、抗感染免疫學(xué)、臨床免疫學(xué)等免疫學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)學(xué)科，以及淋巴細(xì)胞及其亞群分析、淋巴細(xì)胞免疫分型、細(xì)胞因子檢測等臨床研究中，也有了越來越廣泛的應(yīng)用。

2.1 淋巴細(xì)胞及其亞群分析

FCM在臨床淋巴細(xì)胞及其亞群分析中得到廣泛應(yīng)用，可同時檢測出一種或幾種淋巴細(xì)胞細(xì)胞表面抗原，將不同的淋巴細(xì)胞亞群區(qū)分開，并計算出它們相互間的比例。通過淋巴細(xì)胞及其亞群數(shù)量的檢測，可了解在不同情況下機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，輔助臨床疾病的診斷，探索疾病的發(fā)病機(jī)理、病程、預(yù)后，指導(dǎo)臨床治療方案[5]。

由于FCM可以進(jìn)行高靈敏度、高速度和多參數(shù)分析，使FCM對血液淋巴細(xì)胞亞群的檢測較其他方法更精確，故其被認(rèn)為是血液淋巴細(xì)胞亞群分析的標(biāo)準(zhǔn)方法[6]。

2.1.1 檢測項目 在臨床上，淋巴細(xì)胞及其亞群分析項目包括：B/NK/CD4/CD8/CD4：CD8；絕對計數(shù)(TruCount)；活化淋巴細(xì)胞的檢測(CD69/HLADR/CD71/B27)；CD4＋ Th/i和CD8＋Ts/c的進(jìn)一步區(qū)分；Naive/Memory T細(xì)胞亞群的檢測；Th1/Th2亞群的檢測。

用流式細(xì)胞儀診斷某種疾病時，經(jīng)常需要檢測多個項目，如當(dāng)人類感染免疫缺陷病病毒(Human immunodeficiency virus，HIV)后，HIV主要選擇地侵入人類具有重要免疫功能的T淋巴細(xì)胞亞群中的輔助性T細(xì)胞，即Th細(xì)胞(CD4＋)，使具有重要免疫功能的T細(xì)胞群被破壞，繼而累及全身免疫器官，使機(jī)體免疫功能下降。檢測的免疫指標(biāo)表現(xiàn)為：T淋巴細(xì)胞總數(shù)減少(正常值的65%～81%)；T細(xì)胞亞群比值倒置，即Th/Ts<1.0(正常1.3∶12～2.1∶1)；Th細(xì)胞(CD4＋)絕對計數(shù)<200個/μL(正常值400～1 500細(xì)胞/μL)，CD8＋ T細(xì)胞在感染早期增多，后期則下降；Ts細(xì)胞增高，NK細(xì)胞減少或活力下降，B淋巴細(xì)胞群則在正常范圍；CD4＋/CD8＋ 明顯低于健康成人(P<0.01)。

2.1.2 檢測技術(shù)的發(fā)展 隨著新的熒光色素分子的不斷發(fā)現(xiàn)，熒光標(biāo)記技術(shù)的進(jìn)步和流式細(xì)胞儀的多激光激發(fā)技術(shù)的進(jìn)展，多色熒光分析得到迅速發(fā)展，三色、四色甚至五色或六色熒光分析對細(xì)胞亞群的識別、細(xì)胞功能評價等更為精確。近年，淋巴細(xì)胞及其亞群的分析已經(jīng)發(fā)展到三色熒光以上分析，且借用MultiSET全自動獲取分析軟件完成。如：通過四色熒光標(biāo)記，對外周血T淋巴細(xì)胞亞群可進(jìn)行快速、客觀、準(zhǔn)確檢測及絕對計數(shù)分析[78]。利用流式細(xì)胞儀，采用多色熒光標(biāo)記的單克隆抗體，分析黏附性T 細(xì)胞表面CD3＋ CD4＋ 或CD8＋CD19－CD16－CD45RO＋CD62＋CD27＋ CD57 抗原，從而對LFA1adhesive T 細(xì)胞快速準(zhǔn)確地測定[9]。

總之，用流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞及其亞群的檢測技術(shù)朝著多激光、多色分析方向發(fā)展。近年來，為了使樣本一次檢測，得到更多結(jié)果，滿足臨床多色分析診斷的需要，一些廠家為臨床應(yīng)用專門設(shè)計了六色分析流式細(xì)胞儀。

2.2 白血病免疫分型

白血病是白細(xì)胞在分化到某個階段受阻后呈克隆性異常增殖的結(jié)果，它的發(fā)病是多階段的，不同病因引起的白血病的發(fā)病機(jī)制不同，在治療和預(yù)防上也不同，所以，利用白細(xì)胞分化不同階段出現(xiàn)的細(xì)胞表面標(biāo)志，可以對白血病進(jìn)行免疫分型，對其進(jìn)行導(dǎo)向治療[10]。近年，白血病的MICM(形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)，分子生物學(xué))分型已成為現(xiàn)代白血病診斷的重要指標(biāo)，其中應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫表型的檢測在分型中發(fā)揮了越來越重要的作用，現(xiàn)已積累了豐富的應(yīng)用經(jīng)驗。它具有快速、客觀、準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，對白血病進(jìn)行免疫分型具有極其重要的臨床診斷意義[11]。

準(zhǔn)確的免疫分型關(guān)鍵是區(qū)分正常細(xì)胞與白血病細(xì)胞，傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀白血病免疫分型依賴于白血病細(xì)胞的FSC/SSC特性來設(shè)定原始細(xì)胞群，然后根據(jù)門內(nèi)某些陽性單抗占門內(nèi)細(xì)胞的百分比來確定其抗原表達(dá)情況。很顯然，這種方法是不能將原始細(xì)胞與正常細(xì)胞完全分開的。

隨著免疫學(xué)和遺傳學(xué)及流式細(xì)胞儀檢測技術(shù)的發(fā)展，由開始的主要采用間接免疫熒光標(biāo)記法到直接免疫熒光標(biāo)記法，從單色或雙色到利用CD45抗體標(biāo)記設(shè)門法進(jìn)行多色免疫標(biāo)記。利用造血系統(tǒng)細(xì)胞CD45表達(dá)量與細(xì)胞分化程度的高度相關(guān)性，可以精確地將原始/幼稚細(xì)胞與正常成熟細(xì)胞群完全分開。使免疫分型的準(zhǔn)確性得到很大的提高，現(xiàn)在，已成為診斷白血病免疫分型的重要工具[12]。國際上普遍采用三色或四色分析的方法，利用CD45SSC設(shè)門法，并結(jié)合其他技術(shù)進(jìn)行免疫分型。如應(yīng)用流式細(xì)胞儀，采用CD45 SSC 設(shè)門法多參數(shù)，并利用抗體積分系統(tǒng)診斷標(biāo)準(zhǔn)，可以準(zhǔn)確地、完整地分析白血病免疫分型[13]。采用三色流式細(xì)胞術(shù)CD45/側(cè)散射(SSC)雙參數(shù)散點(diǎn)圖設(shè)門，并結(jié)合FAB 形態(tài)學(xué)能對急性白血病進(jìn)行準(zhǔn)確分型[14]。應(yīng)用流式細(xì)胞儀四色熒光標(biāo)記技術(shù)，CD45/SSC雙參數(shù)散點(diǎn)圖設(shè)門方法，能清楚地區(qū)分各種免疫細(xì)胞，可準(zhǔn)確、客觀地進(jìn)行白血病免疫分型[15]。

2.3 血小板膜表面受體檢測

血小板膜上有豐富的糖蛋白受體，是血小板發(fā)揮其功能的物質(zhì)基礎(chǔ)，靜止期和活化期的血小板膜糖蛋白受體的種類、含量、結(jié)構(gòu)和功能顯著不同。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測血小板膜上受體，主要是對血小板特異性膜糖蛋白和活化標(biāo)志物進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記，結(jié)合單克隆抗體和免疫熒光技術(shù)，用不同的抗血小板單克隆抗體，可以從分子水平上診斷血小板功能和數(shù)量的異常。使用流式細(xì)胞儀測定活化血小板是目前公認(rèn)的快捷而靈敏的方法之一[16]，可直接、靈敏、特異地分析血小板的活化程度和功能狀態(tài)。

普遍采用的技術(shù)是以全血為標(biāo)本，應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行多參數(shù)分析，即全血法流式細(xì)胞術(shù)。如采用流式細(xì)胞儀三色熒光標(biāo)記技術(shù)，能準(zhǔn)確地檢測冠心病患者血小板表面糖蛋白的變化[17]。采用流式細(xì)胞儀和三色免疫熒光標(biāo)記的單克隆抗體，可直接檢測全血樣本中血小板膜表面CD41、CD61、CD62的表達(dá)水平[18]。

與常規(guī)血小板功能測定法相比，全血法流式細(xì)胞術(shù)雖然有許多優(yōu)點(diǎn)，如直接使用全血樣本，且標(biāo)本用量少；簡化標(biāo)本的處理，避免了樣本處理不當(dāng)?shù)纫蛩貙?dǎo)致的血小板體外激活，并可防止血小板亞群的丟失，從而更客觀、更準(zhǔn)確地反映血小板的功能[19]。但是，全血法流式細(xì)胞術(shù)也存在不足之處，如流式細(xì)胞儀價格昂貴，為了避免血小板體外活化，血樣不能久置，需在45 min內(nèi)處理；只能分析循環(huán)中的血小板的數(shù)量和功能，不能反映血小板代謝和最近被清除的血小板的數(shù)量。所以，還需對該方法進(jìn)行更深入的研究，并使之標(biāo)準(zhǔn)化[20]。

2.4 細(xì)胞因子的檢測 細(xì)胞因子(cytokine)是由免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子多肽，在調(diào)節(jié)機(jī)體多種細(xì)胞的生長、分化和功能，調(diào)節(jié)正常與病理狀態(tài)下的免疫應(yīng)答過程中起著十分重要的作用。檢測細(xì)胞因子對于闡明機(jī)體免疫應(yīng)答機(jī)制及相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和臨床治療具有重要意義。

隨著研究的進(jìn)展，僅僅對細(xì)胞進(jìn)行定量和活性的檢測已不能滿足需要。目前，越來越重視在單細(xì)胞水平上研究細(xì)胞因子的表達(dá)能力。應(yīng)用流式細(xì)胞儀結(jié)合間接免疫熒光法，可在單細(xì)胞水平上客觀、正確地檢測細(xì)胞內(nèi)多個細(xì)胞因子，并可區(qū)分表達(dá)特定細(xì)胞因子的細(xì)胞亞群，進(jìn)行多參數(shù)相關(guān)分析，是一種有效地在單細(xì)胞水平研究細(xì)胞因子的方法[21]。

近年主要采用的是胞內(nèi)流式分析法。該方法是基于BD公司的快速免疫細(xì)胞因子系統(tǒng)(fast Immune cytokine system)。以植物血凝素(phytohemagglutinin，PHA)，佛波酯(phorbol myristate acetate，PMA)加離子霉素(ionomycin，Ion)作刺激劑，刺激全血中淋巴細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子；用雷菲德菌(Brefeldin A，BFA)與莫能霉素(monensin，MN)等藥物阻斷細(xì)胞因子分泌至胞外，用CD3和CD8設(shè)門，應(yīng)用兩種免疫熒光抗體同時標(biāo)記淋巴細(xì)胞膜表面特異分子和被阻滯在胞內(nèi)的細(xì)胞因子，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測和分析。

該方法具有許多優(yōu)點(diǎn)，如完善的全血激活方法，保留體內(nèi)細(xì)胞及生化微環(huán)境，能更準(zhǔn)確反映體內(nèi)狀況，避免了人工假象的產(chǎn)生。高效熒光結(jié)合抗體，確保高度靈敏及低背景染色。高質(zhì)量的膜通透劑，可以保證一致的靈敏度與低背景染色，且免除了為增加通透性所需冷凍細(xì)胞過夜的步驟。同型對照，避免了使用重組細(xì)胞因子進(jìn)行繁瑣的競爭性封閉。

該技術(shù)雖然已成為一項可在單細(xì)胞水平上檢測細(xì)胞因子的有效方法，尤其是在確定功能不同的T細(xì)胞亞群方面具有重要的作用[22]，具有其他方法難以比擬的優(yōu)點(diǎn)。但是，也存在一定的缺陷，如現(xiàn)有的激活劑可導(dǎo)致部分至表面分子表達(dá)的下調(diào)。因此，今后還要尋找更佳的激活劑。結(jié)語

FCM以其快速、準(zhǔn)確、靈活、大量、多參數(shù)同時分析等優(yōu)點(diǎn)，已成為免疫學(xué)研究領(lǐng)域中無可替代的重要工具?？萍妓降牟粩喟l(fā)展，免疫學(xué)研究的不斷深入，尤其是近年來，流式細(xì)胞儀的功能不斷完善、各種功能強(qiáng)大的分析軟件的開發(fā)、多參數(shù)分析技術(shù)的發(fā)展等，為流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的提高和分析能力的擴(kuò)展提供了保障，并使儀器不斷向小型化，操作自動化，簡單化方向發(fā)展?？梢灶A(yù)見，在未來免疫學(xué)領(lǐng)域，流式細(xì)胞儀的應(yīng)用范圍會進(jìn)一步擴(kuò)大，應(yīng)用深度會進(jìn)一步加強(qiáng)。