第一篇：植物細(xì)胞工程教學(xué)反思

植物細(xì)胞工程教學(xué)反思

海林林業(yè)一中紀(jì)彩云

引入從白菜—甘藍(lán)開始，引出細(xì)胞工程，（白菜2n=20，甘藍(lán)n=18），引出概念，要注意的是操作水平是細(xì)胞水平（基因工程是分子水平），然后講述植物細(xì)胞工程，其技術(shù)手段包括有植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等，其理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性，首先講述的是細(xì)胞的全能性，包括定義、細(xì)胞具有全能性的原因、未表現(xiàn)出來的原因、全能性的高低、與細(xì)胞分化分裂的關(guān)系等。然后是植物組織培養(yǎng)，包括原理、過程、應(yīng)用三個(gè)方面，其中過程是重點(diǎn)，要進(jìn)行詳細(xì)的分析歸納，總結(jié)出其要點(diǎn)和常見的考點(diǎn)。有如下幾點(diǎn)：

1.離體培養(yǎng)，外植體

2.無菌操作

3.培養(yǎng)液成分：瓊脂、水、礦質(zhì)元素、蔗糖（不是葡萄糖）、植物激素等

4.脫分化、去分化、愈傷組織的概念

5.植物激素的比例會(huì)影響到根和芽的分化

6.花藥離體培養(yǎng)屬于植物組織培養(yǎng)，取的是生殖細(xì)胞，得到的是單倍體；大多數(shù)情況下取的是體細(xì)胞，得到的是普通的植株

最后是應(yīng)用部分，包括無病毒植物、快速繁殖、生產(chǎn)藥物、人工種子（注意如何獲得）、轉(zhuǎn)基因植物的培育等。

植物細(xì)胞工程的第二項(xiàng)技術(shù)手段是植物體細(xì)胞雜交，包括原理、過程、意義三個(gè)方面，過程是重點(diǎn)，要進(jìn)行說的講解分析，其中要注意的幾點(diǎn)是：

1.酶解法去除植物細(xì)胞壁

2.原生質(zhì)體誘導(dǎo)融合的方法

3.有一次篩選

第二篇：植物細(xì)胞工程教案

植物細(xì)胞工程

一、教學(xué)目標(biāo)

1、細(xì)胞的全能性（理解）

2、簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。（知道）

二、教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn) 1.教學(xué)重點(diǎn)

（1）植物組織培養(yǎng)的原理和過程。（2）植物體細(xì)胞雜交的原理。2.教學(xué)難點(diǎn) 植物體細(xì)胞雜交

三、教學(xué)過程 導(dǎo)入：

我們已經(jīng)所學(xué)及疑問

1、有性生殖中，受精卵經(jīng)分裂、分化形成各種組織、器官，最后形成個(gè)體。三倍體如何繁殖后代？

2、細(xì)胞的全能性

體細(xì)胞具有全能性的原因是什么？

各種細(xì)胞表達(dá)全能性的能力是否一樣？

在生物體內(nèi)，體細(xì)胞有沒有表達(dá)全能性，為什么？ 體細(xì)胞在什么條件下才會(huì)表達(dá)全能性?

（一）植物組織培養(yǎng)

1、概念

2、植物組織培養(yǎng)的過程。（如下）

脫分化 再分化

外植體 → 愈傷組織 → 根、芽 →植物體

3、條件

4、證明：

（二）植物體細(xì)胞雜交

1、過程 植物細(xì)胞A 植物細(xì)胞B ↓ 去壁

↓

原生質(zhì)體 A 原生質(zhì)體B

↓

↓

原生質(zhì)體融合↓ 再生細(xì)胞壁

雜種細(xì)胞

2、優(yōu)點(diǎn)： 克服遠(yuǎn)源雜交不親和障礙，培育作物新品種?！?細(xì)胞分裂

愈傷組織

↓細(xì)胞分化

雜種植株

第三篇：植物細(xì)胞工程說課稿

植物細(xì)胞工程說課稿

各位領(lǐng)導(dǎo)、老師們，你們好！

今天我要進(jìn)行說課的內(nèi)容是植物細(xì)胞工程 首先，我對(duì)本節(jié)內(nèi)容進(jìn)行分析

一、說教材的地位和作用

《植物細(xì)胞工程》是人教版教材高中生物選修本專題二細(xì)胞工程第1節(jié)內(nèi)容。在此之前，學(xué)生們已經(jīng)復(fù)習(xí)了細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，細(xì)胞分化，細(xì)胞全能性等知識(shí)為本節(jié)內(nèi)容的學(xué)習(xí)起到了鋪墊的作用。因此，本節(jié)內(nèi)容在細(xì)胞工程中具有不容忽視的重要的地位，為了更好的復(fù)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞工程的知識(shí)，所以復(fù)習(xí)好這一節(jié)內(nèi)容起到了承上啟下的作用。本內(nèi)容包含的一些植物細(xì)胞工程技術(shù)知識(shí)，通過與動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)對(duì)比，從而幫助學(xué)生學(xué)習(xí)具有連續(xù)性和系統(tǒng)性，為高考打下良好的基礎(chǔ)。

二、說教學(xué)目標(biāo)

根據(jù)本教材的結(jié)構(gòu)和內(nèi)容分析，結(jié)合著高三年級(jí)學(xué)生他們的認(rèn)知結(jié)構(gòu)及其心理特征，我制定了以下的教學(xué)目標(biāo)：

1、認(rèn)知目標(biāo)：識(shí)記： 細(xì)胞的全能性

2、能力目標(biāo)

簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。列舉植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用。

3、情感、態(tài)度、價(jià)值觀目標(biāo)

可使學(xué)生更深刻地理解知識(shí)理論在實(shí)際生活中的應(yīng)用，并且逐漸地培養(yǎng)學(xué)生具有良好的個(gè)性。認(rèn)同細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)理論研究與技術(shù)開發(fā)之間的關(guān)系；關(guān)注細(xì)胞工程研究的發(fā)展和應(yīng)用前景。

三、說教學(xué)的重、難點(diǎn)

本著高三二輪標(biāo)準(zhǔn)，在吃透教材基礎(chǔ)上，我確定了以下的教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn) 教學(xué)重點(diǎn)：

（1）植物組織培養(yǎng)的原理和過程。（2）植物體細(xì)胞雜交的原理。（3）植物細(xì)胞工程應(yīng)用的實(shí)例。教學(xué)難點(diǎn)： 植物體細(xì)胞雜交

四、說教法

基于本節(jié)課內(nèi)容的特點(diǎn)，我主要采用了以下的教學(xué)方法：

1、直觀演示法：

利用多媒體等手段進(jìn)行直觀演示，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，活躍課堂氣氛，促進(jìn)學(xué)生對(duì)知識(shí)的掌握。

2、活動(dòng)探究法

通過導(dǎo)學(xué)案，以學(xué)生為主體，使學(xué)生的探索性得到了充分的發(fā)揮，培養(yǎng)學(xué)生的自學(xué)能力、思維能力、活動(dòng)組織能力。

3、集體討論法

針對(duì)導(dǎo)學(xué)案和學(xué)生提出的問題，組織學(xué)生進(jìn)行集體和分組討論，促使學(xué)生在學(xué)習(xí)中解決問題，培養(yǎng)學(xué)生的團(tuán)結(jié)協(xié)作的精神。

五、說學(xué)法

我們常說：“現(xiàn)代的文盲不是不懂字的人，而是沒有掌握學(xué)習(xí)方法的人”，因而，我在教學(xué)過程中特別重視學(xué)法的指導(dǎo)。讓學(xué)生從機(jī)械的“學(xué)答”向“學(xué)問”轉(zhuǎn)變，從“學(xué)會(huì)”向“會(huì)學(xué)”轉(zhuǎn)變，成為真正的學(xué)習(xí)的主人。這節(jié)課在指導(dǎo)學(xué)生的學(xué)習(xí)方法和培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)能力方面主要采取以下方法：思考評(píng)價(jià)法、分析歸納法、自主探究法、總結(jié)反思法。

六、說教學(xué)過程

在這節(jié)課的教學(xué)過程中，我注重突出重點(diǎn)，條理清晰，緊湊合理。各項(xiàng)活動(dòng)的安排也注重互動(dòng)、交流，最大限度的調(diào)動(dòng)學(xué)生參與課堂的積極性、主動(dòng)性。

1、學(xué)生朗讀：（3—5分鐘）

學(xué)生通過朗讀配發(fā)的選修3基礎(chǔ)知識(shí)匯總把上節(jié)課所學(xué)習(xí)的內(nèi)容加以鞏固，并且把今天所學(xué)習(xí)的內(nèi)容進(jìn)行簡(jiǎn)單預(yù)習(xí)，從而把相關(guān)的一些知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行記憶。而生物選修3中的一些基礎(chǔ)知識(shí)大多是要進(jìn)行記憶的，對(duì)于提高二輪復(fù)習(xí)效率，這個(gè)環(huán)節(jié)的設(shè)置是必不可少的。

2、導(dǎo)學(xué)案的完成：（15分鐘）

①、要求學(xué)生在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)去完成創(chuàng)新設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)梳理

②、要求學(xué)生完成基礎(chǔ)梳理之后，通過討論解決多媒體所展示的問題。

（一）細(xì)胞的全能性

1、什么是細(xì)胞的全能性？

2、體細(xì)胞具有全能性的原因是什么？

3、各種細(xì)胞表達(dá)全能性的能力是否一樣？

4、在生物體內(nèi)，體細(xì)胞有沒有表達(dá)全能性，為什么？

5、體細(xì)胞在什么條件下才會(huì)表達(dá)全能性?

（二）植物組織培養(yǎng)

（1）離體的器官、組織或細(xì)胞如果不進(jìn)行脫分化處理，能否培養(yǎng)成完整植物體？（2）決定植物細(xì)胞脫分化、再分化的關(guān)鍵因素是什么？

（三）植物體細(xì)胞雜交

（1）要想讓兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞融合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？（2）有沒有一種溫和的去細(xì)胞壁的方法？（3）如果兩個(gè)來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生融合形成了雜種細(xì)胞，下一步該對(duì)此細(xì)胞做何種處理？（4）如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？

（四）植物細(xì)胞工程應(yīng)用的實(shí)例

一、植物繁殖的新途徑

1.微型繁殖技術(shù)為什么能保持親本的優(yōu)良性狀？2.培育植物的莖尖可得到脫毒苗，其中的原因是什么？3.人工種子在生產(chǎn)上有哪些優(yōu)點(diǎn)？

二、作物新品種的培育

1.單倍體育種的原理是什么？2.體細(xì)胞誘變育種對(duì)什么材料進(jìn)行誘變處理？

3、教師和學(xué)生點(diǎn)評(píng)，進(jìn)行課堂小結(jié)，強(qiáng)化認(rèn)識(shí)。（15分鐘）

①、學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)梳理進(jìn)行交叉批改，提高學(xué)生對(duì)知識(shí)的掌握，以及糾錯(cuò)的能力。

②、對(duì)于多媒體的展示的問題進(jìn)行點(diǎn)評(píng)和小結(jié)，對(duì)于簡(jiǎn)單的知識(shí)點(diǎn)可以叫學(xué)生來點(diǎn)評(píng)，難一點(diǎn)的由老師來完成。這樣可以提高學(xué)生的表達(dá)能力，以及組織學(xué)生學(xué)習(xí)的能力。

③、設(shè)置相關(guān)表格和過程圖，或者運(yùn)用創(chuàng)新設(shè)計(jì)中的表格和過程圖對(duì)問題中所涉及到的重點(diǎn)和難點(diǎn)進(jìn)行歸納和梳理，讓學(xué)生在通過小結(jié)的過程中把本堂課的重點(diǎn)和難點(diǎn)理解透徹并掌握，同時(shí)使知識(shí)具有系統(tǒng)性和連貫性?？傊?，課堂小結(jié)，可以把課堂傳授的知識(shí)盡快地轉(zhuǎn)化為學(xué)生的素質(zhì)；可使學(xué)生更深刻地理解知識(shí)理論在實(shí)際生活中的應(yīng)用，并且逐漸地培養(yǎng)學(xué)生具有良好的個(gè)性。

4、課堂作業(yè)（3-5分鐘）

多媒體中相關(guān)練習(xí)，創(chuàng)新設(shè)計(jì)的典例1和訓(xùn)練3，高考真題集訓(xùn)第3題。

5、布置作業(yè)。

完成創(chuàng)新設(shè)計(jì)的其他題目和活頁訓(xùn)練，以及全品小練習(xí)。

七、板書設(shè)計(jì)

我比較注重直觀、系統(tǒng)的板書設(shè)計(jì)，還及時(shí)地體現(xiàn)教材中的知識(shí)點(diǎn)，以便于學(xué)生能夠理解掌握。

板書：略

我的說課完畢，謝謝大家。

說課教師：信豐中學(xué) 余斌

第四篇：2.1.植物細(xì)胞工程 教學(xué)設(shè)計(jì)

選修3 第二章

2.1.1植物細(xì)胞工程基本技術(shù)

【內(nèi)容與解析】

本節(jié)課要學(xué)的內(nèi)容植物細(xì)胞工程基本技術(shù)指的是植物組織培養(yǎng)，其核心是植物組織培養(yǎng)的原理和過程,由于它還與植物體細(xì)胞雜交的原理、植物細(xì)胞工程應(yīng)用的實(shí)例等有…緊密的聯(lián)系,所以在本學(xué)科有…重要的地位。教學(xué)的重點(diǎn)是植物組織培養(yǎng)的原理和過程，解決重點(diǎn)的關(guān)鍵是植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)?！窘虒W(xué)目標(biāo)與解析】 1．教學(xué)目標(biāo)

（1）簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)（2）列舉植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用 2．目標(biāo)解析

（1）簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)就是要學(xué)生知道組培過程中的每一個(gè)步驟且要明白每個(gè)過程中的特點(diǎn)，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)是要學(xué)生知道它的定義和如何實(shí)現(xiàn)這個(gè)過程中的每一步驟?！締栴}診斷分析】

在本節(jié)課的教學(xué)中，學(xué)生可能遇到的問題是植物體細(xì)胞雜交的原理不理解，產(chǎn)生這一問題的原因是…學(xué)生對(duì)這類問題的認(rèn)識(shí)尚淺。要解決這一問題，就要…給予學(xué)生一定的理論知識(shí)，及事例分析。【教學(xué)過程】

問題一： 為什么植物的一個(gè)花瓣就可以培育出完整的植株呢？

設(shè)計(jì)意圖：…通過此問題引出植物組織培養(yǎng) 師生活動(dòng);

1、什么是細(xì)胞的全能性？表現(xiàn)全能性的條件？

2、為什么運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)能把植物離體器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體？

3、克隆羊“多莉”的誕生說明了什么？

4、生物體內(nèi)的細(xì)胞為什么沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成不同的組織器官？

問題二：植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

問題1．植物組織培養(yǎng)技術(shù)的概念是什么？ 問題2．植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理是什么？

問題3．植物組織培養(yǎng)技術(shù)通常選用的材料有哪些？ 問題4．植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有哪些成分？

問題5．分析圖2—5，概述植物組織培養(yǎng)技術(shù)的基本過程。

問題6．什么是脫分化？什么是再分化？什么是愈傷組織？

展示馬鈴薯——番茄雜種植株的圖片，根據(jù)設(shè)想來引出植物體細(xì)胞雜交

問題三：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：

問題1．什么是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)？它具有什么優(yōu)點(diǎn)？

問題2．在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交之前，為什么要去除細(xì)胞壁？通常用什么方法去除細(xì)胞壁？去除細(xì)胞壁以后的植物細(xì)胞叫什么？

問題3．怎樣誘導(dǎo)兩個(gè)不同原生質(zhì)體的融合？原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是什么？這與細(xì)胞中哪種細(xì)胞器有關(guān)？

問題4．為什么兩個(gè)原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)？ 問題5．如果兩個(gè)來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合，下一步該做何處理？ 問題6．如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？

問題7．分析圖2—9，概述植物體細(xì)胞雜交的基本過程。

選修3 第二章

小問（1）說出①～⑤步驟表示的含義。

小問（2）將植物細(xì)胞A和植物細(xì)胞B的得到的原生質(zhì)體誘導(dǎo)融合，在培養(yǎng)基上至少存在幾種類型的細(xì)胞（只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合）？

例題1：在細(xì)胞工程——原生質(zhì)體融合育種技術(shù)中，其技術(shù)的重要一環(huán)是將營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁除去，通常是采用纖維素酶和果膠酶的酶解破壁法處理。如將去掉了細(xì)胞壁的成熟植物細(xì)胞置于清水中，細(xì)胞將（）

A.皺縮 B.脹破 C.呈球形 D.保持原狀

例題2：要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株，不需要（）A.具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞 B.離體狀態(tài)

C.導(dǎo)入外源基因 D.一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素

變式：白菜、甘藍(lán)均為二倍體，體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18。以白菜為母本、甘藍(lán)為父本。經(jīng)人工授粉后，將雌蕊離體培養(yǎng)，可得到“白菜－甘藍(lán)”雜種幼苗。請(qǐng)回答問題：

⑴白菜和甘藍(lán)是兩個(gè)不同的物種，存在 隔離。自然條件下，這兩個(gè)物種間不能通過 的方式產(chǎn)生后代。雌蕊離體培養(yǎng)“白菜－甘藍(lán)”雜種幼苗獲得，所依據(jù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有。⑵二倍體“白菜－甘藍(lán)”的染色體數(shù)為。這種植株通常不育，原因是減數(shù)分裂過程中。為使其可育，可通過人工誘導(dǎo)產(chǎn)生四倍體“白菜－甘藍(lán)”，這種變異屬于。

【課堂小結(jié)】

【目標(biāo)檢測(cè)】

1．植物組織培養(yǎng)是指

A．離體的植物器官或細(xì)胞培育成愈傷組織

B．愈傷組織培育成植株

C．離體的植物器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體 D．愈傷組織形成高度液泡化組織

2．植物體細(xì)胞雜交要先去除細(xì)胞壁的原因是

A.植物體細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組成中不包括細(xì)胞壁

B.細(xì)胞壁使原生質(zhì)體失去活力 C.細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合 D.細(xì)胞壁不是原生質(zhì)的組成部分 3．植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是

（）

（）

（）

選修3 第二章

A.產(chǎn)生雜種植株 B．產(chǎn)生雜種細(xì)胞

C．原生質(zhì)體融合 D．形成愈傷組織 4．將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，下列條件中不需要的是（）

A、具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞

B、一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素

C、離體狀態(tài)

D、導(dǎo)入指定基因 5．植物體細(xì)胞雜交的目的中錯(cuò)誤的是

（）

A.把兩個(gè)植物體的優(yōu)良性狀集中在雜種植株上 B.獲得雜種植株

C.克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙

D.實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體的融合 6．植物組織培養(yǎng)的用途中不正確的是

（）

A.快速繁殖

B.生產(chǎn)新品種 C．生產(chǎn)生物堿 D．生產(chǎn)白細(xì)胞介素－2 7．以下關(guān)于原生質(zhì)的敘述，正確的是

（）

A、原生質(zhì)泛指細(xì)胞內(nèi)的基質(zhì)

B、原生質(zhì)就是細(xì)胞質(zhì)

C、一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)

D、細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞壁是原生質(zhì) 8．不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是

（）A.振動(dòng)

B.電刺激

C.PEG試劑 D．重壓 9．細(xì)胞具有全能性的原因是

（）

A.生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能

B.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性

C.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有個(gè)體發(fā)育的全部基因

D.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來的 10.下列植物細(xì)胞全能性最高的是

（）

A.形成層細(xì)胞 B.韌皮部細(xì)胞

C.木質(zhì)部細(xì)胞

D.葉肉細(xì)胞 11．植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是（）

A、產(chǎn)生新的細(xì)胞壁

B、細(xì)胞膜發(fā)生融合

C、細(xì)胞膜發(fā)生融合 D、細(xì)胞膜發(fā)生融合 12.植物體細(xì)胞雜交的目的是

（）

A.用酶解法去掉細(xì)胞壁分離出有活力的原生質(zhì)體 B.以人工誘導(dǎo)法使兩個(gè)不同植物的原生質(zhì)體融合

C.用植物組織培養(yǎng)法培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體得到雜種植株 D.通過以上三者來完成

二、非選擇題

1．下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示。據(jù)此回答：

脫分化 再分化

①——→②——→③——→④

（1）①表示

，它能被培養(yǎng)成為④的根本原因是

。（2）②表示

，它與①相比分化程度

，全能性

。（3）若想制作人工種子，應(yīng)該選用（填編號(hào)）。

（4）若①是花藥，則④是

，繼續(xù)對(duì)其使用

處理可獲得

正常植株，該過程稱為。

（5）若①是胡蘿卜根尖細(xì)胞，則培養(yǎng)成的④的葉片的顏色是

，這說明根尖細(xì)胞。

（6）若利用此項(xiàng)技術(shù)制造治療燙傷、割傷的藥物——紫草素，培養(yǎng)將進(jìn)行到（填編號(hào)）。

第五篇：植物細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)題

1、高壓滅菌鍋的工作原理和注意事項(xiàng)？

答：工作原理：在密閉的高壓滅菌鍋內(nèi)，其中的蒸氣不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸氣溫度下，持續(xù)15—30分鐘，可殺滅各種微生物及高度耐熱的芽孢。

注意事項(xiàng)：

a 待滅菌的物品放置不宜過緊；

b 堆放滅菌包時(shí)應(yīng)注意安全閥放汽孔位置必須留出空氣，保障其暢通，否則易造成鍋體爆裂事故。

c 必須將冷空氣充分排除，否則鍋內(nèi)溫度達(dá)不到規(guī)定溫度，影響滅菌效果； d 滅菌完畢后，不可放氣減壓，否則瓶?jī)?nèi)液體會(huì)劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導(dǎo)致容器爆裂。須待滅菌器內(nèi)壓力降至與大氣壓相等后才可開蓋。

2、超凈工作臺(tái)的工作原理是什么？

答：鼓風(fēng)機(jī)送入的空氣先通過一個(gè)前置過濾器，濾掉大部分塵埃，再經(jīng)過一個(gè)高效過濾器，除去了大于0.3um的塵埃、真菌和細(xì)菌孢子等。從而形成連續(xù)不斷的無塵無菌的超凈空氣層流，其流速為24~30m/min，這樣的流速不會(huì)妨礙酒精燈的燃燒，同時(shí)工作人員在這樣的無菌條件下操作可保持無菌材料在轉(zhuǎn)接過程中不受污染。

3、母液配制的注意事項(xiàng)。

答：1）配制母液所需藥品應(yīng)采用分析純或化學(xué)純?cè)噭?/p>

2）配制母液用水為蒸餾水或去離子水，試劑可以通過加熱或磁力攪拌器加熱溶解。

3）母液保存時(shí)間不宜過長(zhǎng)，如發(fā)現(xiàn)母液有混濁或沉淀現(xiàn)象發(fā)生，則棄之不用。

4）母液濃度不能過高，否則易產(chǎn)生結(jié)晶，影響試驗(yàn)效果。

5）在配制大量元素母液時(shí)，混合、溶解各種無機(jī)鹽時(shí)要注意先后順序，盡量把Ca2+，SO42-,PO43-等離子錯(cuò)開分別溶解，同時(shí)稀釋濃度要大些，并要慢慢地邊混合邊攪拌。

4、培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)注意哪些因素？培養(yǎng)基為什么要煮沸后再分裝？

答：培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)注意PH和滅菌；①PH影響外植體和培養(yǎng)材料對(duì)離子的吸收，過酸過堿的培養(yǎng)基影響培養(yǎng)材料的生長(zhǎng)；此外，瓊脂培養(yǎng)基的PH值還影響到培養(yǎng)基的凝固狀況。②滅菌，植物組織培養(yǎng)必須在無菌環(huán)境中進(jìn)行。培養(yǎng)基煮沸后再分裝的原因：因?yàn)楹傊呐囵B(yǎng)基會(huì)在40℃左右時(shí)凝固，因?yàn)橐仍谒≈屑訜?，使其成為均勻液態(tài)時(shí)在尚未冷卻情況下盡快分裝。

5、培養(yǎng)基的滅菌過程。

答：①檢查滅菌鍋外層鍋內(nèi)水位，水量過少時(shí)應(yīng)加水。把分裝好的培養(yǎng)基及其他需滅菌的各種器具和蒸餾水放入滅菌鍋的消毒桶內(nèi)。

②蓋上鍋蓋，注意按照說明操作并確定已蓋好，設(shè)置好溫度和時(shí)間參數(shù)，開啟電源加熱滅菌。

③滅菌時(shí)間到后，先切斷電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待滅菌鍋壓力表指針降到0時(shí)，打開排氣閥，旋松螺栓，開啟鍋蓋，取出已滅菌的培養(yǎng)基。④剛滅過菌的培養(yǎng)基成液體狀，取出時(shí)不要用力搖動(dòng)，否則會(huì)導(dǎo)致部分培養(yǎng)基沾附在瓶壁。放置在水平桌面上自然冷卻。在室溫下放置1-2天，觀察有無微生物生長(zhǎng)，以確定培養(yǎng)基是否徹底滅菌。經(jīng)檢查沒有雜菌生長(zhǎng)的方可使用。

6、調(diào)節(jié)pH值應(yīng)該調(diào)高0.2-0.3個(gè)單位，為什么？

答：因?yàn)樵诟邏簻缇^程中，培養(yǎng)基的某些成分會(huì)發(fā)生分解氧化，常使培養(yǎng)基的pH值發(fā)生一定幅度的變化，pH值的變化方向和幅度取決于多種因素，如培養(yǎng)基的成分，濃度，滅菌時(shí)間及溫度等，因此在設(shè)定培養(yǎng)基pH值時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況做適當(dāng)調(diào)整。

7、哪些因素影響培養(yǎng)基的凝固？

答：1）pH值調(diào)節(jié)不準(zhǔn)確，偏酸 ；

2）滅菌時(shí)間過長(zhǎng)，破壞了瓊脂的結(jié)構(gòu)； 3）瓊脂質(zhì)量及用量的問題。

8、1mol/L HCl和NaOH的配制方法？

答：如要1mol/L HCl 配制1L（36%鹽酸密度 1.18g/mL，37%鹽酸密度 1.19g/mL，）

方法一：須配制1mol/L × 1L= 1mol HCl，則 1 × 36.5÷ 36% ÷1.18 =85.9mL。

方法二：1.18 × 1000 × 36% ÷ 36.5 = 11.64 mol/L，根據(jù)m1*v1=m2*v2，v1=（1mol/L × 1L）÷ 11.64 mol/L = 85.9 mL。即取36%鹽酸溶液85.9 mL定容于1L的蒸餾水水中。1mol/L NaOH的配制方法：取40g NaOH固體溶解于蒸餾水中，最后定容至1L。

9、為什么常在消毒液中加入1～2滴表面活性劑如吐溫80？

答：吐溫80作為一種表面活性劑，具有乳化、擴(kuò)散、增溶、穩(wěn)定等作用。在消毒液中加入1～2滴吐溫80可以促使消毒液更充分地濕潤(rùn)整個(gè)外植體組織，進(jìn)而將消毒液滲透、擴(kuò)散到菌團(tuán)內(nèi)部，達(dá)到更好的消毒效果。

10.在接種過程中，通過哪些措施來防止雜菌對(duì)接種工具、接種材料的污染？ ? 污染原因歸結(jié)為3個(gè)方面: 1）是組織培養(yǎng)室或接種室的清潔問題;2）是外植體自身帶菌;3）是組織培養(yǎng)過程各環(huán)節(jié)操作不適宜或不嚴(yán)格。

11、胡蘿卜切塊滅菌后為什么要反復(fù)清洗？在接種時(shí)為什么一定要切割胡蘿卜塊的外圍？切割多大接種才最合適？被接種的部位一定要含有哪種組織，為什么？

增殖率=（增殖的外植體數(shù)量/接種外植體數(shù)量）*100%；

增殖系數(shù)（倍數(shù)）= 繼代培養(yǎng)后產(chǎn)生的莖芽總數(shù)/繼代接種時(shí)的外植體個(gè)數(shù)； 污染率=（污染的外植體數(shù)量/接種外植體數(shù)量）*100%；

誘導(dǎo)率(%)=(分化出叢生芽的外植體數(shù)量/接種外植體數(shù)量)*100%； 注：增殖率，誘導(dǎo)率的計(jì)算均應(yīng)除去污染的外植體。