第一篇：HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)和含量方法驗(yàn)證小結(jié)

本貼的目的：討論目前審評(píng)尺度下，藥品研發(fā)過程中，分析方法的驗(yàn)證項(xiàng)目及目的，試驗(yàn)方法，試驗(yàn)要求

本帖僅僅針對(duì)于HPLC方法進(jìn)行討論

方法開發(fā)的內(nèi)容不在本帖討論范圍內(nèi)

1．有關(guān)物質(zhì)（適用于API，制劑，也適用于起始物料，中間體）

有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證的前提條件：

1.各雜質(zhì)與主峰的混合溶液能用擬定的分析方法有效分離

2.根據(jù)混合溶液中各峰的紫外吸收波長(zhǎng)（或單獨(dú)測(cè)定各組分紫外吸收），選擇合適的檢測(cè)波長(zhǎng)。多波長(zhǎng)檢測(cè)（如有）則分別考察。

3.在檢測(cè)波長(zhǎng)下，選擇峰高最小的，計(jì)算S/N，預(yù)估主成分濃度 4.各雜質(zhì)純度已知

5.根據(jù)合成跟蹤檢測(cè)，合理制定各雜質(zhì)的限度 6.供試品溶解方法和提取方法得到合理證明

1.1專屬性： 1.1.1概念

在其他成分（如其他雜質(zhì)，輔料，溶劑）可能存在的情況下，擬定的分析方法能正確測(cè)定被檢測(cè)物的能力。1.1.2試驗(yàn)方法 1.1.2.1定位試驗(yàn)： A.目的

對(duì)各已知雜質(zhì)和主峰進(jìn)行定位 B.試驗(yàn)方法：

a．配制一定濃度（能夠顯示出峰純度，一般為0.1mg/ml）的各已知雜質(zhì)溶液、擬檢測(cè)濃度的主成分作為定位溶液

b．配制限度濃度各已知雜質(zhì)與檢測(cè)濃度的主成分的混合溶液作為分離度試驗(yàn)溶液 c．使用擬定分析方法分別進(jìn)行定位。C.試驗(yàn)要求：

a．空白應(yīng)不干擾各雜質(zhì)的測(cè)定：如雜質(zhì)附近有空白峰，二者分離度應(yīng)大于1.5；雜質(zhì)峰保留時(shí)間處不得為梯度峰拐點(diǎn)

b．定位溶液中，已知雜質(zhì)與主峰的峰純度應(yīng)符合規(guī)定

c．分離度試驗(yàn)溶液中，主峰與相鄰雜質(zhì)的分離度應(yīng)大于2.0（至少1.5）；各已知雜質(zhì)之間的分離度應(yīng)大于1.5（至少1.2）； 1.1.2.2強(qiáng)制降解試驗(yàn) A.目的

一是通過考察藥品在一系列劇烈條件下的穩(wěn)定性，了解該藥品內(nèi)在的穩(wěn)定特性及其降解途徑與降解產(chǎn)物。其二，這些試驗(yàn)也能在一定程度上對(duì)有關(guān)物質(zhì)分析方法用于檢查降解產(chǎn)物的專屬性進(jìn)行驗(yàn)證。B.試驗(yàn)方法

對(duì)于高溫、光照、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及強(qiáng)氧化劑的濃度及時(shí)間、取樣方式等沒有明確的規(guī)定。具體品種具體模索，初步試驗(yàn)了解樣品對(duì)影響的因素（高溫、光照、酸、堿、氧化）等條件基本穩(wěn)定情況后，進(jìn)一步調(diào)整破壞試驗(yàn)條件，只要使主藥有一定量的降解，并對(duì)可能的降解途徑和降解機(jī)制進(jìn)行分析，保證實(shí)驗(yàn)的意義即可。試驗(yàn)一般的范圍為：

強(qiáng)酸：0.1~5.0mol/L HCl溶液或視情況調(diào)節(jié)時(shí)間，溫度，體積 強(qiáng)堿：0.1~5.0mol/L NaOH溶液或視情況調(diào)節(jié)時(shí)間，溫度，體積

強(qiáng)氧化劑：30%的H2O2或視情況配制不同濃度的溶液或視情況調(diào)節(jié)時(shí)間，溫度 高溫：固體狀態(tài)下穩(wěn)定的主藥，可以考慮溶解后以液體狀態(tài)進(jìn)行試驗(yàn) 光照：固體狀態(tài)下穩(wěn)定的主藥，可以考慮溶解后以液體狀態(tài)進(jìn)行試驗(yàn) C.試驗(yàn)要求

a.一般樣品含量控制在85%—90%范圍（歸一化法），不一定要求每個(gè)條件都能降解出來。

b.在進(jìn)行酸、堿、強(qiáng)氧化破壞試驗(yàn)時(shí)，每個(gè)試驗(yàn)最好都要做相應(yīng)的空白（溶劑，空白輔料，復(fù)方制劑還包括除去某一主藥的其他組分）破壞試驗(yàn)作為輔助。

c.主峰純度符合規(guī)定，與相鄰雜質(zhì)分離度大于2.0（至少1.5），已知雜質(zhì)與相鄰雜質(zhì)分離度大于1.2 d.物料守恒，即未破壞主藥的C/A與破壞后的C/A值相比，結(jié)果在0.9~1.1之間

e.關(guān)于破壞試驗(yàn)，更多內(nèi)容請(qǐng)參閱lyslinjiu版主在帖子【討論】2013-專屬性實(shí)驗(yàn)（強(qiáng)制降解試驗(yàn)）2013-專屬性實(shí)驗(yàn)（強(qiáng)制降解試驗(yàn)）-丁香園論壇

f.在此處做梯度時(shí)間（如有）延長(zhǎng)驗(yàn)證試驗(yàn)。即將分析方法的梯度中，有機(jī)相比例最大的時(shí)長(zhǎng)延長(zhǎng)（建議延長(zhǎng)時(shí)間為主峰保留時(shí)間或10~20min），考察是否降解出難以洗脫的物質(zhì)在擬定方法的梯度周期內(nèi)能有效檢出。進(jìn)一步考察分析方法的合理性

1.2定量限 1.2.1概念

樣品中能被定量測(cè)定的最低量，有定量意義。1.2.2驗(yàn)證方法 A.目的

考察雜質(zhì)的能被定量的最低量，同時(shí)評(píng)判供試品濃度的選擇是否合理 B.試驗(yàn)方法

配制限度濃度的各已知雜質(zhì)與主成分的混合溶液作為貯備液，進(jìn)樣，逐步稀釋至S/N約為10時(shí)，得定量限。C.試驗(yàn)要求

定量限濃度不得高（修正，原為低）于限度濃度的1/5

1.3檢測(cè)限 1.3.1概念

樣品中能被檢測(cè)出的最低量，僅作為限度試驗(yàn)指標(biāo)和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。1.3.2驗(yàn)證方法 A.目的

考察雜質(zhì)的最低檢出量，同時(shí)評(píng)判供試品濃度的選擇是否合理 B.試驗(yàn)方法

配制限度濃度的各已知雜質(zhì)與主成分的混合溶液作為貯備液，進(jìn)樣，逐步稀釋至S/N約為3時(shí)，得檢測(cè)限。C.試驗(yàn)要求

檢測(cè)限濃度不得高（修正，原為低）于限度濃度的1/10

1.4溶液穩(wěn)定性 1.4.1目的

考察被測(cè)各溶液在特定時(shí)間周期內(nèi)的穩(wěn)定性 1.4.2試驗(yàn)方法

a.配制系統(tǒng)適應(yīng)性溶液、供試品溶液、對(duì)照品溶液，在室溫條件下，分別在各時(shí)間點(diǎn)進(jìn)樣 b.如不穩(wěn)定，需考察在低溫條件下的溶液穩(wěn)定性

c.時(shí)間范圍根據(jù)試驗(yàn)需要來確定。比如做回收率中需要至少連續(xù)測(cè)定9份供試品，是所有單個(gè)驗(yàn)證項(xiàng)目中最長(zhǎng)的，選擇這個(gè)時(shí)間點(diǎn)是可以的。也有考慮到以后需要測(cè)定更多的樣品，選擇更長(zhǎng)的時(shí)間范圍。1.4.3試驗(yàn)要求

a.系統(tǒng)適應(yīng)性溶液，各峰之間分離度應(yīng)符合要求。b.對(duì)照品溶液峰面積RSD應(yīng)小于2.0% c.供試品溶液，雜質(zhì)個(gè)數(shù)和雜質(zhì)量應(yīng)一致，峰面積RSD應(yīng)小于5.0%；不得檢出新增雜質(zhì) d.如不穩(wěn)定，需臨用現(xiàn)配或低溫保存

1.5儀器精密度 1.5.1概念

同一溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，其tR和峰面積的精密度，考察儀器的進(jìn)樣精密度 1.5.2試驗(yàn)方法

配制限度濃度的各雜質(zhì)和主成分的混合溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次 1.5.3試驗(yàn)要求 a.tR的RSD小于2.0% b.各峰面積RSD小于2.0%

1.6線性與校正因子 1.6.1概念

在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，被測(cè)物濃度與峰面積的線性關(guān)系 1.6.2試驗(yàn)方法

配制各雜質(zhì)和主成分的混合溶液，逐步稀釋，濃度范圍從定量限至限度濃度的120%以上，至少配制5份以上溶液。由2人分別進(jìn)行。1.6..3試驗(yàn)要求

a.線性關(guān)系系數(shù)r大于0.990 b.Y軸截距應(yīng)在100％響應(yīng)值的25％以內(nèi) c.響應(yīng)因子的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于10% d.2人測(cè)得斜率之比在0.98~1.02之間

e.計(jì)算出來的校正因子應(yīng)進(jìn)行修約，在0.9~1.1范圍內(nèi)的，修約為1.0進(jìn)行計(jì)算；0.2~5.0范圍內(nèi)的，按校正因子計(jì)算；0.2~5.0范圍外的，按外標(biāo)法計(jì)算。

1.7精密度 1.7.1概念

同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定結(jié)果之間的接近程度。1.7.2重復(fù)性 1.7.2.1試驗(yàn)方法

由同一試驗(yàn)人員，取同一均勻供試品，平行配制6份供試品溶液，測(cè)定雜質(zhì)百分含量。1.7.2.2試驗(yàn)要求

a.檢出雜質(zhì)個(gè)數(shù)，雜質(zhì)相對(duì)保留時(shí)間，各雜質(zhì)百分含量均應(yīng)一致 b.單個(gè)雜質(zhì)的百分含量的極差應(yīng)在其含量±10%以內(nèi) c.雜質(zhì)總量的RSD應(yīng)小于5.0% 1.7.3中間精密度 1.7.3.1試驗(yàn)方法 同一實(shí)驗(yàn)室，由不同試驗(yàn)人員在不同時(shí)間使用不同設(shè)備，平行配制6份供試品溶液，測(cè)定雜質(zhì)百分含量。1.7.3.2試驗(yàn)要求 a.同1.7.2.2-a和b b.單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量的RSD應(yīng)小于10.0%

1.8回收率 1.8.1概念

用擬定分析方法所測(cè)得結(jié)果與真實(shí)值接近的程度。1.8.2試驗(yàn)方法

a.配制各雜質(zhì)的混合貯備液

b.稱取供試品適量，精密加入混合雜質(zhì)貯備液適量，配制成溶液，使供試品濃度為測(cè)定濃度，雜質(zhì)濃度分別為限度濃度的50%，100%，150%。各濃度均平行配制3份 c.配制混合雜質(zhì)對(duì)照品溶液和自身對(duì)照溶液 1.8.3試驗(yàn)要求

a.各濃度下的回收率應(yīng)在90%~110%之間 b.回收率（N=9）的RSD應(yīng)小于10.0% c.用加校正因子的自身對(duì)照法計(jì)算結(jié)果應(yīng)與雜質(zhì)外標(biāo)法計(jì)算結(jié)果一致

1.9耐用性 1.9.1概念

在擬定的分析方法有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為所建立的分析方法用于常規(guī)檢測(cè)提供依據(jù)

1.9.2試驗(yàn)方法

a.分析方法中可變動(dòng)的因素有：流動(dòng)相組成比例，水相pH，柱溫，色譜柱（同一品牌不同批次，不同品牌的常用色譜柱），流速，檢測(cè)波長(zhǎng)

b.配制系統(tǒng)適應(yīng)性溶液，供試品溶液，對(duì)照品溶液進(jìn)行測(cè)定 1.9.3試驗(yàn)要求

a.系統(tǒng)適應(yīng)性溶液應(yīng)符合規(guī)定；如不符合規(guī)定，則需更嚴(yán)格控制所變化的因素，直至找到一個(gè)合適的范圍；如指定色譜柱，嚴(yán)格控制pH等等

b.檢測(cè)雜質(zhì)個(gè)數(shù)，雜質(zhì)的相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)與精密度結(jié)果一致 c.測(cè)得雜質(zhì)量應(yīng)與精密度結(jié)果一致

2．含量測(cè)定（適用于API，制劑，也適用于單個(gè)雜質(zhì)控制）含量測(cè)定方法驗(yàn)證的前提條件：

1.空白（溶劑和輔料）和各雜質(zhì)不干擾主峰的測(cè)定

2.根據(jù)主成分的紫外吸收波長(zhǎng)（復(fù)方需分別單獨(dú)測(cè)定各組分紫外吸收），選擇合適的檢測(cè)波長(zhǎng)。多波長(zhǎng)檢測(cè)（如有）則分別考察。

3.在檢測(cè)波長(zhǎng)下，計(jì)算S/N，預(yù)估主成分濃度 4.供試品溶解方法和提取方法得到合理證明

2.1專屬性： 2.1.1概念

在其他成分（如其他雜質(zhì)，輔料，溶劑）可能存在的情況下，擬定的分析方法能正確測(cè)定主成分的能力。2.1.2試驗(yàn)方法 2.1.2.1定位試驗(yàn)： A.目的同1.1.2.1-A B.試驗(yàn)方法同1.1.2.1-B C.試驗(yàn)要求：

a．空白應(yīng)和各雜質(zhì)不得干擾主成分的測(cè)定，主峰保留時(shí)間處不得為梯度峰拐點(diǎn)（如有）b．定位溶液中，主峰的峰純度應(yīng)符合規(guī)定

c．分離度試驗(yàn)溶液中，主峰與相鄰雜質(zhì)的分離度應(yīng)大于2.0 2.1.2.2強(qiáng)制降解試驗(yàn) A.目的

一是通過考察藥品在一系列劇烈條件下的穩(wěn)定性，了解該藥品內(nèi)在的穩(wěn)定特性及其降解途徑與降解產(chǎn)物。其二，這些試驗(yàn)也能在一定程度上對(duì)含量測(cè)定分析方法用于檢查主成分的專屬性進(jìn)行驗(yàn)證。B.試驗(yàn)方法 同1.1.2.2-B C.試驗(yàn)要求

a.主峰純度符合規(guī)定，與相鄰雜質(zhì)分離度大于2.0 其他同1.1.2.2-C

2.2定量限 2.2.1概念

樣品中能被定量測(cè)定的最低量，有定量意義。2.3.2驗(yàn)證方法 A.目的

考察主成分的能被定量的最低量，同時(shí)評(píng)判供試品濃度的選擇是否合理 B.試驗(yàn)方法

配制檢測(cè)濃度的主成分溶液，進(jìn)樣，逐步稀釋至S/N約為10時(shí)，得定量限。C.試驗(yàn)要求

定量限濃度不得高（修正，原為低）于檢測(cè)濃度的1/10

2.3溶液穩(wěn)定性

試驗(yàn)要求為主成分峰面積RSD小于2.0% 如溶出檢測(cè)方法同含量，建議考察一個(gè)溶出曲線周期內(nèi)的溶液穩(wěn)定性 其他同1.4項(xiàng)下 2.4儀器精密度

試驗(yàn)要求為主成分峰面積RSD小于2.0% 其他同1.5項(xiàng)下

2.5線性與校正因子 2.5.1概念

在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，被測(cè)物濃度與峰面積的線性關(guān)系 2.5.2試驗(yàn)方法

配制主成分貯備液，逐步稀釋，濃度范圍從檢測(cè)濃度80%至120%，至少配制5份以上溶液。由2人分別進(jìn)行。2.5.3試驗(yàn)要求 同1.6.3

2.6精密度 2.6.1概念

同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定結(jié)果之間的接近程度。2.6.2重復(fù)性 2.6.2.1試驗(yàn)方法

由同一試驗(yàn)人員，取同一均勻供試品，平行配制6份供試品溶液，測(cè)定主成分百分含量。2.6.2.2試驗(yàn)要求

6份供試品含量結(jié)果RSD應(yīng)小于2.0% 2.6.3中間精密度 2.6.3.1試驗(yàn)方法

同一實(shí)驗(yàn)室，由不同試驗(yàn)人員在不同時(shí)間使用不同設(shè)備，平行配制6份供試品溶液，測(cè)定主成分百分含量。2.6.3.2試驗(yàn)要求

a.6份供試品含量結(jié)果RSD應(yīng)小于2.0% b.12份供試品含量結(jié)果RSD應(yīng)小于2.0%

2.7回收率 2.7.1概念

用擬定分析方法所測(cè)得結(jié)果與真實(shí)值接近的程度。2.7.2試驗(yàn)方法

a.API在精密度，線性和專屬性推算出來的情況下可豁免驗(yàn)證

b.制劑：稱取空白輔料適量（相當(dāng)于100%檢測(cè)濃度的主藥），精密加入對(duì)照品（或已知含量的主藥）適量，配制成溶液，使供試品濃度分別為測(cè)定濃度80%，100%，120%。各濃度均平行配制3份 c.配制對(duì)照品溶液 2.7.3試驗(yàn)要求

a.各濃度下的回收率應(yīng)在99%~101%之間 b.回收率（N=9）的RSD應(yīng)小于2.0%

2.8耐用性 2.8.1概念

2.8.2試驗(yàn)方法：同1.9.1 2.8.3試驗(yàn)要求：同1.9.2 測(cè)得結(jié)果應(yīng)與精密度結(jié)果一致 其他同1.9.3

第二篇：含量測(cè)定分析方法驗(yàn)證的可接受標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)介

含量測(cè)定分析方法驗(yàn)證的可接受標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)介

摘要：本文介紹了在對(duì)含量測(cè)定所用的分析方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)，各項(xiàng)指標(biāo)的可接受標(biāo)準(zhǔn)，以利于判斷該分析方法的可行性。

關(guān)鍵詞：含量測(cè)定 分析方法驗(yàn)證 可接收標(biāo)準(zhǔn)

為規(guī)范對(duì)各種分析方法的驗(yàn)證要求，我國(guó)已于2005年頒布了分析方法驗(yàn)證的指導(dǎo)原則。該指導(dǎo)原則對(duì)需要驗(yàn)證的分析方法及驗(yàn)證的具體指標(biāo)做了比較詳細(xì)的闡述。但是文中未涉及各具體指標(biāo)在驗(yàn)證時(shí)的可接受標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)際上已頒布的指導(dǎo)原則中也未發(fā)現(xiàn)相關(guān)的要求。

1．準(zhǔn)確度

該指標(biāo)主要是通過回收率來反映。驗(yàn)證時(shí)一般要求分別配制濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份，分別測(cè)定其含量，將實(shí)測(cè)值與理論值比較，計(jì)算回收率。

可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平均回收率均應(yīng)在98.0%-102.0%之間，9個(gè)回收率數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于2.0%。

2．線性

線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗(yàn)證方法為：

在80％至120％的濃度范圍內(nèi)配制6份濃度不同的供試液，分別測(cè)定其主峰的面積，計(jì)算相應(yīng)的含量。以含量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行線性回歸分析。

可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸截距應(yīng)在100％響應(yīng)值的2％以內(nèi)，響應(yīng)因子的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。

3．精密度

1）重復(fù)性

配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個(gè)分析人員在盡可能相同的條件下進(jìn)行測(cè)試，所得6份供試液含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。

2）中間精密度

配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由兩個(gè)分析人員使用不同的儀器與試劑進(jìn)行測(cè)試，所得12個(gè)含量數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。

4．專屬性

可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：空白對(duì)照應(yīng)無干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行純度分析時(shí)，主峰的純度因子應(yīng)大于980。

5．檢測(cè)限

主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。

6．定量限

主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于10。另外，配制6份最低定量限濃度的溶液，所測(cè)6份溶液主峰的保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。

7．耐用性

分別考察流動(dòng)相比例變化±5％、流動(dòng)相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、流速相對(duì)值變化±20％時(shí)，儀器色譜行為的變化，每個(gè)條件下各測(cè)試兩次?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。

8、系統(tǒng)適應(yīng)性

配制6份相同濃度的供試品溶液進(jìn)行分析，主峰峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，主峰保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須達(dá)到基線分離，主峰的理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

第三篇：實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法的驗(yàn)證

檢測(cè)限是指試樣中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要準(zhǔn)確定量。該驗(yàn)證指標(biāo)的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測(cè)能力。判斷方法有非儀器分析目視法（直觀法）與信噪比法

定量限系指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。定量限體現(xiàn)了分析方法是否具備靈敏的定量檢測(cè)能力。雜質(zhì)定量試驗(yàn)，需考察方法的定量限，以保證含量很少的雜質(zhì)能夠被準(zhǔn)確測(cè)出。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定方法的定量限。判斷方法有信噪比法。

線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)劑型和分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。

故檢測(cè)限、定量限、線性常用對(duì)照品試驗(yàn)。

準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或認(rèn)可的參考值接近的程度。對(duì)于制劑一般以回收率試驗(yàn)來進(jìn)行驗(yàn)證。中藥制劑及生物藥物分析中，常采用加樣回收率法（在已知含量的樣品A中加入一定量的對(duì)照品B），化藥制劑常采用回收率法（在空白輔料中加入原料藥對(duì)照品C，還應(yīng)作單獨(dú)輔料的空白測(cè)定D），要求至少測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度，每個(gè)濃度測(cè)定三次，共提供9個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。加樣回收率=（測(cè)定值M –樣品中含量A）/加入標(biāo)準(zhǔn)品值B×100%

回收率＝（測(cè)定值M-空白值D）/ 加入量C×100%

回收率的RSD一般應(yīng)為2%以內(nèi)。

精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。精密度包括：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。

故準(zhǔn)確度及精密度則需用供試品及對(duì)照品試驗(yàn)。

一、準(zhǔn)確度(回收率)

準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以回收率(%)表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立。

1．含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度

原料藥可用已知純度的對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含已知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定。

如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，或與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。

如該法已建立了精密度、線性和專屬性，準(zhǔn)確度有時(shí)也能推算出來，不必再做。

2．雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度

可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。

假如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。如不能測(cè)得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的相對(duì)響應(yīng)因子，則可用原料藥的響應(yīng)因子。

應(yīng)明確證實(shí)單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)於主成分的重量比(%)，或是面積比(%)。

3．?dāng)?shù)據(jù)要求

在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，例如制備3個(gè)不同濃度的樣品，各測(cè)定3次。

應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率(%)，或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其可信限。

所以加樣回收率反映的是方法的準(zhǔn)確度，是評(píng)價(jià)方法好壞的指標(biāo)這一，是誤差理論在藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的具體應(yīng)用。準(zhǔn)確度=(測(cè)量值-真實(shí)值)/真實(shí)值*100%。

實(shí)際工作中，其實(shí)不存在藥物的真實(shí)值的(我們所有的數(shù)據(jù)都是測(cè)量值，都是人們用一定的方法測(cè)出來的)。其他領(lǐng)域也一樣。

於是人們找一種比較可靠的得到的值規(guī)定為真實(shí)值。這就是加樣回收率的方法。

比如，為了評(píng)價(jià)阿司匹林片劑的含量測(cè)定方法，用天平稱一定量(如：100mg)的對(duì)照品，加入到阿司匹林的片劑輔料中，這一定量的對(duì)照品就是真實(shí)值。用建立的方法測(cè)出來是99mg，這個(gè)方法的準(zhǔn)確度就是99%，或加樣回收率是99%，根據(jù)藥品的具體情況，當(dāng)這個(gè)回收率達(dá)到一定范圍時(shí)(比如99%-101%)就認(rèn)為方法是準(zhǔn)確的。

在你標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)的高中低，一般是中間濃度一個(gè)，然后低于中間濃度20%一個(gè)，高于中間濃度20%一個(gè)

不論是擬采用什么方法，就是加樣回收測(cè)定，高中低三個(gè)劑量，在你的線性范圍內(nèi)，每個(gè)樣品測(cè)定三次，最好和試驗(yàn)一起，沒有系統(tǒng)誤差

第四篇：天然氣水露點(diǎn)水含量測(cè)定方法總結(jié)

天然氣處理與加工

—天然氣水露點(diǎn)/水含量測(cè)定方法總結(jié)

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目

錄

一．前言

二．天然氣水含量的測(cè)定 1.絕對(duì)法

（1）吸收稱重法(ISO11541)（2）卡爾費(fèi)休法(ISO10101)<1>.電位滴定法 <2>.庫侖法

（3）電解法（SY/T7507-1997）（4）紅外法 2.相對(duì)法（1）色譜法（2）濕度計(jì)法

<1>.電容法 <2>.壓電法 <3>.電導(dǎo)法 <4>.光學(xué)法

三．天然氣水露點(diǎn)的測(cè)定

冷卻鏡面法(GB/T17238-1998)四．參考文獻(xiàn)

一．前言

水蒸氣含量或水露點(diǎn)是商品天然氣一項(xiàng)重要的技術(shù)指標(biāo)。天然氣從地下產(chǎn)出,一般均含有一定量的水。而且天然氣在輸配過程中通過積存有水的管網(wǎng),也會(huì)使水存在于天然氣中。水會(huì)形成水合物,可能引起管線水堵。在低溫條件下,可能造成管線冰堵。水還會(huì)使管線、設(shè)備和儀表產(chǎn)生腐蝕,直接影響天然氣計(jì)量的準(zhǔn)確度,給天然氣的安全生產(chǎn)和使用造成極大危害。管輸天然氣、車用壓縮天然氣等產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)(SY7514-1988和SY/T7546-1996)均對(duì)水的含量做了嚴(yán)格規(guī)定。故測(cè)定天然氣的水含量、水露點(diǎn)尤為重要，下面二三部分對(duì)其測(cè)定方法進(jìn)行了總結(jié)。

二．天然氣水含量的測(cè)定

1.絕對(duì)法

（1）吸收稱重法(ISO11541)吸收稱量法是一種簡(jiǎn)便易操作,且能用于高壓下在線測(cè)定的方法。國(guó)際上頒布了ISO11541：1997《天然氣-高壓下水含量的測(cè)定》，該方法適用于壓力>1 MPa、水含量≧10 mg/m3的天然氣,也可應(yīng)用于含硫化氫的天然氣。

基本原理為一定體積的氣體通過充填有顆粒狀P2O5的吸收管,氣體中水被P2O5吸收形成磷酸。吸收管增加的重量即為氣體中所含水的量。在氣體流速為2~3 m3/h,總的通過體積為1.5~3 m3的條件下,方法不確定度預(yù)計(jì)為測(cè)定值的±5%(但不優(yōu)于5 mg/m3),檢測(cè)限預(yù)計(jì)為10 mg/m3。水含量的測(cè)定：按圖3裝配測(cè)定裝置。在吸收管中填入顆粒狀的P2O5后稱量吸收管(m0),將吸收管裝入壓力容器中。調(diào)節(jié)流速讓氣體通過吸收管,待通過量達(dá)到1.5~3 m3時(shí),減壓后卸下壓力容器,再一次稱量吸收管(m1)。吸收量不應(yīng)超過吸收管吸收容量一半,否則無效。

（2）卡爾費(fèi)休法(ISO10101-1,2,3)

ISO/TC193于1993年頒布了以卡爾費(fèi)休法測(cè)定天然氣中水含量的3項(xiàng)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),即導(dǎo)論、電位滴定法和庫侖法。

卡爾費(fèi)休法的基本原理是氣體樣品中的水同卡爾費(fèi)休試劑(吡啶/甲醇混合物)中的碘和二氧化硫發(fā)生反應(yīng)。反應(yīng)式為: CH3OH+SO2+R3Ny[R3NH]SO3CH3 H2O+I2+[R3NH]SO3CH3+2R3Ny[R3NH]SO4CH3+2[R3NH]I 在應(yīng)用中將根據(jù)實(shí)際情況選擇使用電位滴定法和庫侖法。

<1>.電位滴定法

該方法適用于水含量在5~5 000 mg/m3的天然氣。方法原理為一定體積的氣體通過含相對(duì)少量堿性吸收液的吸收池,氣體中所含的水溶于吸收液中,然后用卡爾費(fèi)休試劑滴定,終點(diǎn)由電位法確定?？栙M(fèi)休試劑相當(dāng)?shù)乃窟m宜值約為5 mg/ml。

水含量的測(cè)定:卡爾費(fèi)休電位儀平面示意圖見圖1。在滴定池中 加入適量的堿性吸收液,滴加卡爾費(fèi)休試劑反復(fù)調(diào)零直至穩(wěn)定。需要的話也可加入足夠量的水來調(diào)零。待取樣管線吹掃干凈后,將取樣管線同滴定池連接,并通入一定量的氣體,滴加試劑使指針保持在零位。記錄流量計(jì)上的讀數(shù)V、溫度T及壓力值P和滴加的試劑體積VR。由于取樣管線和樣品流等的不確定度,第一次滴定結(jié)果通常誤差較大,故舍棄。多次重復(fù)測(cè)定,取平均值。

<2>.庫侖法

該方法適用于水含量在5~5 000 mg/m3的天然氣和其它氣體。方法原理為一定體積的氣體通過含無水陽極溶液的滴定池。氣體中水被陽極溶液溶解吸收。由碘化物電解產(chǎn)生的碘按卡爾費(fèi)休試劑反應(yīng)原理同水發(fā)生反應(yīng)。用庫侖法測(cè)定消耗的碘即可得到溶解水的量。

水含量的測(cè)定：卡爾費(fèi)休庫侖儀平面示意圖見圖2。在陽極溶液池中加入適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后滴定。滴定結(jié)果應(yīng)在誤差范圍內(nèi)同標(biāo)準(zhǔn)溶液實(shí)際含水量一致。待取樣管線吹掃干凈后,將取樣管線同滴定池連接,邊通入一定量的氣體,邊滴定。對(duì)低水含量氣體,則推薦待通入氣體達(dá)到一定量后再開始滴定。當(dāng)氣體中水含量低于100 mg/m3時(shí),應(yīng)進(jìn)行空白試驗(yàn)(在氣體入口安裝一個(gè)P2O5吸收管)以校正樣品攪動(dòng)造成的碘蒸發(fā)損失。由于取樣管線和樣品流等的不確定度,第一次滴定結(jié)果通常誤差較大,故放棄。多次重復(fù)測(cè)定,取平均值。

（3）電解法（SY/T7507-1997）

SY/T7507-1997規(guī)定了用電解法測(cè)定天然氣中水含量的方法,適用于水含量體積分?jǐn)?shù)小于4 000×10-6的天然氣。若天然氣中無凝液存在且總硫含量小于500 mg/m3,對(duì)測(cè)定無影響。

電解法測(cè)定天然氣中含水量的原理是樣品氣以一定的恒速通過電解池,其中的水分被電解池內(nèi)的五氧化二磷膜層吸收,生成亞磷酸后被電解為氫氣和氧氣排出,而五氧化二磷得以再生。電解電流的大小正比于樣品氣中的水含量,故可用電解電流來量度樣品氣中的水量。

測(cè)定儀器：天然氣工業(yè)常用的USI-1A型微量水分測(cè)定儀，其基本結(jié)構(gòu)如圖2所示(圖中干燥器4內(nèi)裝有40~60目5A分子篩)。（4）紅外法

基本原理：包括水蒸氣在內(nèi)的大多數(shù)氣體都會(huì)在特定的波長(zhǎng)上吸收紅外線,且吸光率是與該氣體的濃度有關(guān),因而測(cè)定吸光率即可測(cè)定氣體中的水蒸氣含水量。2.相對(duì)法（1）色譜法

基本原理:用帶有熱導(dǎo)池檢測(cè)器的氣相色譜儀，由色譜拄將試樣中水與其它組分分離，根據(jù)記錄下的水的峰面積(或峰高)，用外標(biāo)法計(jì)算水分的含量。

定性分析：試樣中的水分采用純物對(duì)照保留時(shí)間定性。首先用l 注射器向汽化室注入O．1μL純水，并記下水的保留時(shí)間，然后經(jīng)六通閥進(jìn)一燃?xì)庠嚇?，出峰后?duì)照純水的保留時(shí)間找出試樣中的水峰。定量分析：試樣的水分含量采用外標(biāo)法定量計(jì)算，即用與試樣中水分含量相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)試樣進(jìn)行外標(biāo)定量，也可采用甲醇作外標(biāo)物進(jìn)行 定量。（2）濕度計(jì)法 <1>.電容法

基本原理：傳感元件為貼有一層金箔的純鋁片,后者經(jīng)硫酸處理而形成一個(gè)多孔的氧化鋁層,從而構(gòu)成電容器的2個(gè)電極。當(dāng)氣流中水蒸氣被氧化鋁層吸收時(shí),電容就相應(yīng)發(fā)生變化。<2>.壓電法

基本原理：傳感元件大多為石英制作的壓電晶體。把兩側(cè)裝有電極且涂敷了吸濕性物質(zhì)的壓電晶體片安裝在共振器上,當(dāng)后者以特定的頻率振動(dòng)時(shí),其頻率與電極厚度、晶體類型、電極質(zhì)量等因素有關(guān)。壓電晶體吸收了氣流中的水蒸氣后,振動(dòng)頻率就相應(yīng)發(fā)生變化。<3>.電導(dǎo)法

基本原理：當(dāng)一種不飽和鹽溶液與含水蒸氣的氣體接觸時(shí),前者就吸收后者中的水蒸氣,直到兩者的水蒸氣分壓相平衡。在鹽溶液吸收水蒸氣后,其電導(dǎo)也相應(yīng)發(fā)生變化。<4>光學(xué)法

基本原理：傳感元件為法貝一佩羅德(FABRY一PERaT)型光學(xué)共振器,它由約20片反射指數(shù)不同的薄片組成。反射指數(shù)高的材料一般為金屬氧化物(如氧化錯(cuò)),而反射指數(shù)低的材料則為吸濕性物質(zhì)。當(dāng)光學(xué)共振器吸收水蒸氣后,其反射光譜相應(yīng)發(fā)生變化,吸收水分愈多則被反射光的波長(zhǎng)愈長(zhǎng),故分析反射光譜的變化即能測(cè)定氣體中的水蒸氣含量。

關(guān)于以上方法測(cè)定水含量的比較總結(jié)如表1所示：

三．天然氣水露點(diǎn)的測(cè)定

冷卻鏡面法(GB/T17238-1998)該標(biāo)準(zhǔn)等效采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO6327-1981《天然氣水露點(diǎn)的測(cè)定冷卻鏡面凝析濕度計(jì)法》。制訂國(guó)標(biāo)前,由四川石油管理局天然氣研究院對(duì)ISO6327進(jìn)行了驗(yàn)證研究。結(jié)果表明:該國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的精密度較高,測(cè)定范圍寬,檢測(cè)下限低,適合于等效采用作為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),但為能適應(yīng)我國(guó)天然氣工業(yè)的實(shí)際情況,擴(kuò)大了測(cè)定范圍。

冷卻鏡面凝析濕度計(jì)法是通過檢測(cè)濕度計(jì)上的水蒸氣凝析物或檢查鏡面上凝析物的穩(wěn)定性來測(cè)定水露點(diǎn)。經(jīng)處理的管輸天然氣的水露點(diǎn)范圍一般為-25℃~5℃。在相應(yīng)的氣體壓力下,水含量的體積分?jǐn)?shù)為50×10-6~200×10-6。特殊情況下水露點(diǎn)測(cè)定范圍也可以更寬。如果樣品在測(cè)試系統(tǒng)中的總壓力大于或等于大氣壓,上述濕度計(jì)不需校正也可用于測(cè)定水的蒸氣壓,水蒸氣分壓與所測(cè)露點(diǎn)間的關(guān)系取決于所用方法和測(cè)量水平。如果測(cè)定環(huán)境中含有凝析溫度接近或高于水露點(diǎn)的氣體,則水露點(diǎn)℃的測(cè)定相當(dāng)困難。

儀器與測(cè)定：以美國(guó)千德勒(EG&G Chandler)石油儀器公司 生產(chǎn)的13-200型露點(diǎn)儀為例,其基本結(jié)構(gòu)如圖1所示。測(cè)定時(shí),樣品氣先進(jìn)入樣品池,用出口閥調(diào)節(jié)出口流量至最佳。向致冷室注入致冷劑使導(dǎo)冷桿降溫,與之連接的鏡面溫度也隨之下降。當(dāng)通過觀察 孔見到鏡面中央開始有微小的圓形露點(diǎn)出現(xiàn)時(shí),記下此溫度值;再升溫觀察露點(diǎn)剛好消失的溫度。前后兩個(gè)溫度的平均值即為水露點(diǎn)。

四．參考文獻(xiàn) 陳賡良.測(cè)定天然氣水蒸氣含量/水露點(diǎn)的方法與儀器.石油儀器，2000,14（4）陳賡良.天然氣物性的直接測(cè)定.石油儀器，1999,13（6）3 羅 勤，邱少林.天然氣中水含量分析方法標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)介.石油與天然氣化工，2000,96 4 顏曉琴.四種天然氣水含量分析方法的對(duì)比研究.石油與天然氣化工,2012,41(3)5 張寶成，李春瑛.人工煤氣、天然氣和液化石油氣中水分的氣相色譜分析,1996,12(2)6 萬征平.電解法測(cè)定天然氣含水量評(píng)價(jià)及改進(jìn)措施.中國(guó)石油長(zhǎng)慶油田分公司第一采氣廠 楊 芳,石曉松.吸收稱量法測(cè)定天然氣中的水含量.化學(xué)研究與應(yīng)用,2008,20(5)

第五篇：水中物質(zhì)含量（范文模版）

2，水質(zhì)分析中有無亞硝酸根離子的檢測(cè)項(xiàng)目。

(查的)

離子色譜可以分析亞硫酸根啊，http://.cn/netshow/SH100311/paperdetail.asp?id=1347

另外也可以用滴定的方法來測(cè)，用I2作為滴定劑?；蛘咭部梢杂梅止夤舛确▉頊y(cè)量。

GB/T 5009.34—1996

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

食品中亞硫酸鹽的測(cè)定方法

Method for determination of sulphite in foods

GB/T 5009.34—1996主題內(nèi)容與適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中亞硫酸鹽的測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中亞硫酸鹽殘留量的測(cè)定。

第一篇 鹽酸副玫瑰苯胺法（第一法）原理

亞硫酸鹽與四氯汞鈉反應(yīng)生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再與甲醛及鹽酸副玫瑰苯胺作用生成紫紅色絡(luò)合物，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。本方法最低檢出濃度為1 mg/kg。試劑

3．1 四氯汞鈉吸收液：稱取13.6 g氯化高汞及6.0 g氯化鈉，溶于水中并稀釋至1 000 mL，放置過夜，過濾后備用。

3．2 氨基磺酸銨溶液（12 g/L）。

3．3 甲醛溶液（2 g/L）：吸取0.55 mL無聚合沉淀的甲醛（36%），加水稀釋至100 mL，混勻。

3．4 淀粉指示液：稱取1 g可溶性淀粉，用少許水調(diào)成糊狀，緩緩傾入100 mL沸水中，隨加隨攪拌，煮沸，放冷備用，此溶液臨用時(shí)現(xiàn)配。

3．5 亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6 g亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]，加水溶解并稀釋至100 mL。

3．6 乙酸鋅溶液：稱取22 g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]溶于少量水中，加入3 mL冰乙酸，加水稀釋至100 mL。

3．7 鹽酸副玫瑰苯胺溶液：稱取0.1 g鹽酸副玫瑰苯胺（C19H18N2Cl·4H2O；p-rosanilinen hydrochloride）于研缽中，加少量水研磨使溶解并稀釋至100 mL。取出20 mL，置于100 mL容量瓶中，加鹽酸（1+1），充分搖勻后使溶液由紅變黃，如不變黃再滴加少量鹽酸至出現(xiàn)黃色，再加水稀釋至刻度，混勻備用（如無鹽酸副玫瑰苯胺可用鹽酸品紅代替）。鹽酸副玫瑰苯胺的精制方法：稱取20 g鹽酸副玫瑰苯胺于400 mL水中，用50 mL鹽酸（1+5）酸化，徐徐攪拌，加4～5 g活化炭，加熱煮沸2 min。將混合物倒入大漏斗中，過濾（用保溫漏斗趁熱過濾）。濾液放置過夜，出現(xiàn)結(jié)晶，然后再用布氏漏斗抽濾，將結(jié)晶再懸浮于1 000 mL乙醚-乙醇（10：1）的混合液中，振搖3～5 min，以布氏漏斗抽濾，再用乙醚反復(fù)洗滌至醚層不帶色為止，于硫酸干燥器中干燥，研細(xì)后貯于棕色瓶中保存。

3．8 碘溶液[c（1/2I2）= 0.1 mol/L]。

3．9 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液[c(Na2S2O3·5H2O)=0.1 mol/L]。

3．10 二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.5 g亞硫酸氫鈉，溶于200 mL四氯汞鈉吸收液中，放置過夜，上清液用定量濾紙過濾備用。

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部 1996—09—19 批準(zhǔn) 1996—09—01 實(shí)施

GB/T 5009.34—1996

吸取10.0 mL亞硫酸氫鈉-四氯汞鈉溶液于 250 mL碘量瓶中，加100 mL水，準(zhǔn)確加入20.00 mL碘溶液（0.1 mol/L），5 mL冰乙酸，搖勻，放置于暗處2 min后迅速以硫代硫酸鈉（0.1 mol/L）標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡黃色，加0.5 mL淀粉指示液，繼續(xù)滴至無色。另取100 mL水，準(zhǔn)確加入碘溶液20.0 mL（0.1 mol/L）、5 mL冰乙酸，按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。

計(jì)算： 1003.32)(121××?=cVVX………………………………（1）

式中：X1——二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mg/mL；

V1——測(cè)定用亞硫酸氫鈉-四氯汞鈉溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；

V2——試劑空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；

c——硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度，mol/L；

32.03——與每毫升硫代硫酸鈉[c(Na2S2O3·5H2O)=1.000 mol/L]標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)?shù)亩趸虻馁|(zhì)量，mg。

3．11 二氧化硫使用液：臨用前將二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液以四氯汞鈉吸收液稀釋成每毫升相當(dāng)于2 μg二氧化硫。

3．12 氫氧化鈉溶液（20 g/L）。

3．13 硫酸（1+71）。儀器

分光光度計(jì)。分析步驟

5．1 樣品處理

5．1．1 水溶性固體樣品如白砂糖等可稱取約10.00 g均勻樣品（樣品量可視含量高低而定），以少量水溶解，置于100 mL容量瓶中，加入4 mL氫氧化鈉溶液（20 g/L），5 min后加入4 mL硫酸（1+71），然后加入20 mL四氯汞鈉吸收液，以水稀釋至刻度。

5．1．2 其他固體樣品如餅干、粉絲等可稱取5.0～10.0 g研磨均勻的樣品，以少量水濕潤(rùn)并移入100 mL容量瓶中，然后加入20 mL四氯汞鈉吸收液，浸泡4 h以上，若上層溶液不澄清可加入亞鐵氰化鉀溶液及乙酸鋅溶液各2.5 mL，最后用水稀釋至100 mL刻度，過濾后備用。

5．1．3 液體樣品如葡萄酒等可直接吸取5.0～10.0 mL樣品，置于100 mL容量瓶中，以少量水稀釋，加20 mL四氯汞鈉吸收液，搖勻，最后加水至刻度，混勻，必要時(shí)過濾備用。

5．2 測(cè)定

吸取 0.50～5.0 mL上述樣品處理液于25 mL帶塞比色管中。

另吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00 mL二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)使用液（相當(dāng)于0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、3.0、4.0 μg二氧化硫），分別置于25 mL帶塞比色管中。于樣品及標(biāo)準(zhǔn)管中各加入四氯汞鈉吸收液至10 mL，然后再加入1 mL氨基磺酸銨溶液（12 g/L）、1 mL甲醛溶液（2 g/L）及1 mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液，搖勻，放置20 min。用cm比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)550 nm處測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部 1996—09—19 批準(zhǔn) 1996—09—01 實(shí)施

GB/T 5009.34—1996

5．3 計(jì)算 10001000100/10003112××××=VmAX……………………………（2）

式中：X2——樣品中二氧化硫的含量，g/kg；

A1——測(cè)定用樣液中二氧化硫的含量，μg；

m1——樣品質(zhì)量，g ；

V3——測(cè)定用樣液的體積，mL。

結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)均值的3位有效數(shù)字。

5．4 允許差

相對(duì)相差≤10%。

第二篇 蒸餾法（第二法）原理

在密閉容器中對(duì)樣品進(jìn)行酸化并加熱蒸餾，以釋放出其中的二氧化硫，釋放物用乙酸鉛溶液吸收。吸收后用濃鹽酸酸化，再以碘標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)所消耗的碘標(biāo)準(zhǔn)溶液量計(jì)算出樣品中的二氧化硫含量。本法適用于色酒及葡萄糖漿、果脯。試劑

7．1 鹽酸（1+1）：濃鹽酸用水稀釋1倍。

7．2 乙酸鉛溶液（20 g/L）：稱取2 g乙酸鉛，溶于少量水中并稀釋至100 mL。

7．3 碘標(biāo)準(zhǔn)溶液[c（1/2I2=0.01 mol/L）]：將碘標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1 mol/L）用水稀釋10倍。

7．4 淀粉指示液（10 g/L）：稱取1 g可溶性淀粉，用少許水調(diào)成糊狀，緩緩傾入100 mL沸水中，隨加隨攪拌，煮沸2 min，放冷，備用，此溶液應(yīng)臨用時(shí)新制。儀器

8．1 全玻璃蒸餾器。

8．2 碘量瓶。

8．3 酸式滴定管。分析步驟

9．1 樣品處理

固體樣品用刀切或剪刀剪成碎末后混勻，稱取約5.00 g均勻樣品（樣品量可視含量高低而定）。液體樣品可直接吸取5.0～10.0 mL樣品，置于500 mL圓底蒸餾燒瓶中。

9．2 測(cè)定

9．2．1 蒸餾：將稱好的樣品置入圓底蒸餾燒瓶中，加入250 mL水，裝上冷凝裝置，冷凝管下端應(yīng)插入碘量瓶中的25 mL乙酸鉛（20 g/L）吸收液中，然后在蒸餾瓶中加入10 mL鹽酸（1+1），立即蓋塞，加熱蒸餾。當(dāng)蒸餾液約200 mL時(shí)，使冷凝管下端離開液面，再蒸餾1 min。用少量蒸餾水沖洗插入乙酸鉛溶液的裝置部分。在檢測(cè)樣品的同時(shí)要做空白試驗(yàn)。

9．2．2 滴定：向取下的碘量瓶中依次加入10 mL濃鹽酸、1 mL淀粉指示液（10 g/L）。搖勻之后用碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.01 mol/L）滴定至變藍(lán)且在30 s內(nèi)不褪

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色為止。

9．3 計(jì)算 2231000032.001.0)(mBAX×××?=………………………………（3）

式中：X3——樣品中的二氧化硫總含量，g/kg；

A2——滴定樣品所用碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.01 mol/L）的體積，mL；

B——滴定試劑空白所用碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.01 mol/L）的體積，mL；

m2——樣品質(zhì)量，g；

0.032——與1 mL碘標(biāo)準(zhǔn)溶液[c（1/2I2=1.000 mol/L）]相當(dāng)?shù)亩趸虻馁|(zhì)量，g。附加說明：

本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司提出。

本標(biāo)準(zhǔn)第一法由北京市衛(wèi)生防疫站、廣東省衛(wèi)生防疫站、衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所負(fù)責(zé)起草。

本標(biāo)準(zhǔn)第二法由衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、北京市衛(wèi)生防疫站、山東省食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、河北省衛(wèi)生防疫站、北京市崇文區(qū)衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托技術(shù)歸口單位衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所負(fù)責(zé)解釋。

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★亞硝酸根的檢驗(yàn)

第一種方法：PH在1.7以下，亞硝酸鹽和氨基苯黃酸反應(yīng)生成重氮鹽，再與N-（1-萘基）-乙二胺反應(yīng)生成紅色染料；

第二種方法：加強(qiáng)酸，如鹽酸。

亞硝酸鹽遇強(qiáng)酸生成不穩(wěn)定的HNO2，隨即分解為N2O3，使水溶液呈淺藍(lán)色；N2O3又分解為NO和NO2，使氣相出現(xiàn)NO2的紅棕色。

NO2-

硝酸根離子的檢驗(yàn)

目的：認(rèn)識(shí)檢驗(yàn)硝酸根離子的方法。

用品：試管、試管架、試管夾、量筒。

硝酸鉀、硫酸亞鐵、濃硫酸。

原理：硝酸根離子有氧化性，在酸性溶液中能使亞鐵離子氧化成鐵離子，而自己則還原為一氧化氮。一氧化氮能跟許多金屬鹽結(jié)合生成不穩(wěn)定的亞硝基化合物。它跟硫酸亞鐵反應(yīng)即生成深棕色的硫酸亞硝基鐵：

3Fe2++NO3-+4H+=3Fe3++2H2O+NO

FeSO4+NO=Fe（NO）SO4

實(shí)驗(yàn)室里常利用這個(gè)反應(yīng)檢驗(yàn)硝酸根離子，稱為棕色環(huán)試驗(yàn)。這種簡(jiǎn)單亞硝基化合物只存在于溶液內(nèi)，加熱時(shí)，一氧化氮即從溶液內(nèi)完全逸出。

亞硝酸根離子也能發(fā)生類似的反應(yīng)。要區(qū)別這兩種酸根離子可以用濃磷酸，亞硝酸根離子能顯現(xiàn)深棕色而硝酸根離子卻不能。

準(zhǔn)備和操作：往試管里注入3毫升1摩/升的硝酸鉀溶液和3毫升1摩/升的硫酸亞鐵溶液，振蕩試管，混和均勻。斜持試管，沿試管壁慢慢注入濃硫酸3毫升（圖7-97），使密度較大的濃硫酸沉入試管的底部，跟硝酸鉀和硫酸亞鐵的混和溶液分成兩層。稍待片刻，把試管慢慢豎直，不久，兩層液體間就有一個(gè)棕色的環(huán)生成。

注意事項(xiàng)：硫酸亞鐵必須是新制備的，硫酸必須是濃的。操作時(shí)不能把溶液沖渾。

其它實(shí)驗(yàn)方法：適用于固態(tài)的硝酸鹽或相當(dāng)濃的硝酸鹽溶液。把少量的硝酸鹽晶體或濃溶液置于試管內(nèi)，然后加入少量濃硫酸（1∶1）。再向試管內(nèi)加入一小塊銅片。給試管加熱，有紅棕色氣體產(chǎn)生，則證明含有硝酸根離子。

Cu+2NO3-+4H+Cu2++2NO2↑+2H2O

亞硝酸根離子去除

大量導(dǎo)入氧氣

將亞硝酸根離子進(jìn)行氧化